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小鼠抗单核细胞抗体ELISA试剂盒操作步骤

关键词: 古朵生物,小鼠ELISA试剂盒
资料类型: docx
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上传时间: 2020年03月24日 17:19
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上传人: 上海古朵生物科技有限公司
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资料简介

中文全称：小鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒
英文名称：Mouse anti-Monocyte antibody,AMA ELISA kit
供应商：上海古朵生物
产品规格：48T/96T
产地：国产/进口
样本：血清，血浆，细胞培养上清液，尿液，组织匀浆及相关液体样等
标记物：人，大鼠，小鼠，豚鼠，猪，牛，羊等种属
应用：科研实验
检测方法：双抗体夹心法，间接法，竞争法等
检测限：人，大鼠，小鼠，豚鼠，猪，牛，羊等种属

小鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISA检测试剂盒应用范围可概括四个方面：
1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。
2、研究抗酶抗体的合成。
3、显现微量的免疫沉淀反应。
4、定量检测体液中抗原或抗体成份。

样本处理方法
植物样本：
1，样本在保持鲜重的同时，重量不能低于50mg
2，组织匀浆比例按照10%进行，相当于1g组织加9ml的匀浆液，匀浆液要求用PBS，浓度是0.01mol/L，PH控制在7.2-7.4我们并不要求没个样本的重量必须保持1g整数，只要大于50mg即可，相对应匀浆液按照1:9的关系随之改变即可
3，剪碎叶片组织放入碾钵，然后液氮碾磨成粉末，加入换算后的匀浆液的量
4，离心取上清
备注：换算结果是乘以加入匀浆液的量，除以称取的重量，这个终换算比例相当于乘以9g除以1ml,如果检测细胞内部，需要加一个超声破碎过程！
组织匀浆三原则
剪碎叶片组织放入碾钵，然后液氮碾磨成粉末，加入换算后的均浆液的量。这个不会处理的话，可以直接邮寄叶片我们处理。

小鼠抗单核细胞抗体（AMA）elisa检测试剂盒样本需求量:
植物是组织样本，固体要求的重量是大于50mg。血清血浆50微升以上，一个样本。对大鼠小鼠液体样本需求可以适当放宽，但必须大于10微升以上

组织匀浆原则：
1，对于样本要求保持鲜重
2，称取样本中的重量不小于50mg，一般以1g为基准,但不严格要求固定样本每个重量必须达到相同的水平。
3，匀浆的比例选取10%，相当于1g组织加9ml的匀浆液来进行匀浆。
4，匀浆液选取PBS（PH=7.2-7.4，浓度为0.01mol/L）
5，匀浆过程选用组织匀浆器，冰浴上匀浆。(或者进行液氮碾磨)
6，离心取上清，离心转速选用5000转每分，时间是15分钟。取上清液待检！
血清血浆的收集
首先要求确定样本收集类型，血清还是血浆？一般情况收集血清为好，血清收集2种方法，如下：

1.促凝管（临床上用橘红色管头）待分层后取上清液保存

2.自然凝固，取普通生化试管，自然凝固30分钟以上，然后离心取上清，离心转速为2000转每分，时间15分钟。

全血收集完成后进了分离出血红细胞，避免导致溶血对实验产生干扰
其次涉及样本保存，因为不确定老师样本取样周期和实验周期到底有多长，这个过程涉及以下问题。

1.关于样本检测问题，如果样本取样周期过程，涉及到分不同时间段来检测，那么试剂盒的批次也会出现差异，会有一定的变异系数。这个过程有2个建议，第1，可以收集一定数量（满足一个试剂盒的量或者几个试剂盒的量）来进行一次实验。避免样本长时间保存（样本保存时间越长，蛋白降解风险越大），但缺点是会用到不同批次试剂盒，影响批间差。第二个就是把样本全部收集好了后，再一次进行实验，用同一批次试剂盒。这个可以减少批间差，但样本不同时间取样会导致前后样本数值之间会存在一定的差异性。这个还是要根据实际取样周期和取样量来做决定。

2.如果取样周期比较久，而且每次样本不是很多，每天或者短时间都有样本出来，这个情况样本涉及到保存。保存条件是1周内实验的，2-8℃，一周以上一个月以内实验，-20℃保存，一月以上-80℃保存。

血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
批号：现制备
有效期：6个月

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