100管/96样 氧化磷酸化系列/NADH辅酶Q测试盒/(微量法)

氧化磷酸化系列/NADH辅酶Q测试盒/(微量法)是上海酶联生物为您精心研发用于实验方法的生化试剂盒产品，也是您科研路上的好帮手，产品说明资料欢迎您来电索取。

氧化磷酸化系列/NADH辅酶Q测试盒/(微量法)

产品规格 : 100管/96样

测试方法：微量法

产品分类：氧化磷酸化系列

产品品牌：mlBio/酶联生物

产品包装：液体盒装

运输条件：快递包邮

应用范围：仅供科研研究使用

保存条件：低温避光保存

有效期：６个月

说明书 : 咨询或电询客服索取

供应商：上海酶联生物科技有限公司

注    意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

氧化磷酸化系列/NADH辅酶Q测试盒/(微量法)

测定意义：
复合体Ⅰ（EC 1.6.5. 3）又称NADH-CoQ 还原酶或NADH脱氢酶，广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中，是线粒体内膜中 的蛋白复合物。该酶催化一对电子从NADH传递给CoQ，同时可使O2还原生成O2.-，是呼吸电子传递链上产生O2.-的主要部位。测定该酶活性，不仅可以反映呼吸电子传递链（ETC）状态，而且可以反映活性氧（ROS）生成状态。
测定原理：
复合体Ⅰ能够催化NADH脱氢生成NAD+，在340nm下测定NADH的氧化速率计算出该酶活性的大小。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
样本的前处理：
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：
①准确称取0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL试剂一和10uL 试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
②将匀浆600g，4℃离心5min。
③弃沉淀，将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心10min。
④上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白，可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ（此步可选做）。
⑤步骤④中的沉淀即为线粒体，加入200uL试剂二和2uL 试剂三，超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10秒，重复30次），用于复合体Ⅰ酶活性测定。