100管/48样 氧化磷酸化系列/三磷酸腺苷测试盒/微量法

氧化磷酸化系列/三磷酸腺苷测试盒/微量法是上海酶联生物为您精心研发用于实验方法的生化试剂盒产品，也是您科研路上的好帮手，产品说明资料欢迎您来电索取。

氧化磷酸化系列/三磷酸腺苷测试盒/微量法

产品规格 :100管/48样

测试方法：微量法

产品分类：氧化磷酸化系列

产品品牌：mlBio/酶联生物

产品包装：液体盒装

运输条件：快递包邮

应用范围：仅供科研研究使用

保存条件：低温避光保存

有效期：６个月

说明书 : 咨询或电询客服索取

供应商：上海酶联生物科技有限公司

注    意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

氧化磷酸化系列/三磷酸腺苷测试盒/微量法

测定意义：

线粒体复合体Ⅴ又称F1F0-ATP合酶，广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中，由F1和F0两个亚单位组成。该酶利用呼吸链产生的质子电化学梯度催化ATP合成，也可逆过程水解ATP。此外，复合体Ⅴ还存在于叶绿体、异养菌和光合细菌中。复合体Ⅴ是线粒体氧化磷酸化和叶绿体光合磷酸化合成ATP的关键酶。

测定原理：

复合体Ⅴ水解ATP产生ADP和Pi，通过测定Pi增加速率来测定复合体Ⅴ活性。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

样本的前处理：

组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：

①准确称取0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL试剂一和10uL 试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。

②将匀浆600g，4℃离心5min。

③弃沉淀，将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心10min。

④上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白，可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅴ（此步可选做）。

⑤步骤④中的沉淀即为线粒体，加入800uL试剂二和8uL 试剂三，超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10秒，重复30次），用于复合体Ⅴ酶活性测定。