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兔子神经营养因子3(NT-3)ELISA检测试剂盒

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上海古朵现货供应兔子神经营养因子3(NT-3)ELISA检测试剂盒,中文名:兔子神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒,
别名:兔子神经营养因子3(NT-3)ELISA Kit,规格:48t/96t,保存:2~8℃,有效期:6个月,检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

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上海古朵生物详细介绍兔子神经营养因子3(NT-3)ELISA检测试剂盒的信息说明,注意事项及其他咨讯,本司所供应的ELISA试剂盒包含大鼠ELISA试剂盒,小鼠ELISA试剂盒,人ELISA试剂盒,马ELISA试剂盒,兔ELISA试剂盒,猴ELISA试剂盒,植物ELISA试剂盒,豚鼠ELISA试剂盒,其他种属等,欢迎订购!

<strong><strong>兔子神经营养因子3(NT-3)ELISA检测试剂盒</strong></strong>说明书

兔子神经营养因子3(NT-3)ELISA检测试剂盒说明

 

【信息说明】

中文名:兔子神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒

别名:兔子神经营养因子3(NT-3)ELISA  Kit

供应商:上海古朵

规格:48t/96t

保存:2~8℃

有效期:6个月

样本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。

特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。

用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。

种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。

检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

 

【配制组成】

1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。

2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。

3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4、*标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。

6、*标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)

7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)

8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10、 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

 

【操作步骤】

1、待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。 

2、酶标板置4℃,包被过夜。

3、洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。

4、阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 

5、酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 

6、洗板,同(4)。 

7、每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 

8、酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 

9、洗板,同(4)。 

10、每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。 

11、每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 

12、分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。

13、数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

 

【注意事项】

1、实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

2、试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

3、使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。

4、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。  

5、洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

6、使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7、加入试剂的顺序应*,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

8、按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

9、底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

 

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