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液体处理专家如何自动化、标准化捕获测序文库制备

来源: 贝克曼库尔特商贸(中国)有限公司    2020年10月12日 14:26  
  目标区域捕获测序技术,是根据已知特定基因组区域序列设计寡核苷酸探针,通过杂交将目标区域捕获富集进行二代测序。其针对目标区域深度测序,增加了检查灵敏度和准确性。既满足研究需求,又降低测序成本,在科研、临床中均备受关注。
 
  液体处理专家贝克曼库尔特推出Biomek 自动化捕获测序方案,帮助您实现自动化、标准化的捕获测序。 由自动化工作站进行基因捕获,可以减少手工操作时间,提高工作效率,增加结果的重复性和均一性。 Biomek工作站可实现从核酸提取,文库构建,定量混样到捕获的整体实验流程。
 
  Figure 1. 捕获测序文库构建自动化流程
 
  由Biomek成功自动化的杂交捕获试剂盒:
 
   Agilent HaloPlex™ Target Enrichment - Ion Torrent
   Agilent SureSelect XT®
   Epicentre ScriptSeq® Complete Gold Low Input
   Illumina Nextera® Rapid Capture
   Illumina TruSeq® Exome
   Illumina TruSeq® Rapid Exome
   Illumina TruSight® Cancer
   Illumina TruSight® Tumor 15
   Illumina TruSight® Tumor 170
   IDT xGen® Exome Research Panel
   NEB NEBNext Direct™ Cancer HotSpot Panel
   Roche Nimblegen SeqCap EZ® for Illumina NGS
Biomek自动化捕获测序数据展示
 
  Figure 2. IDT xGen® Exome Research Panel试剂盒捕获测序文库制备。
 
  上图: 片段分析,其中主峰1和2为杂交捕获后cfDNA目标片段峰;
 
  下图:Qubit Fluorometric Quantification核酸定量结果。
 
  Figure 3. IDT xGen®杂交捕获试剂盒历史手工数据vs.
 
  Biomek i7自动化工作站完成数据。A. 平均中靶率,B. 重复率,C. 覆盖度,D. GC偏移。
 
  Biomek向导式软件操作界面
 
  在软件操作界面上用户可以选择样本数量,是否使用台面整合的PCR仪,以及运行工作流程的哪个部分。此外,具备台面自动校对功能,当操作人员完成耗材摆放后,工作站可根据摄像头拍摄,自动判定耗材摆放是否正确,对错误摆放位置进行提示。避免由于人为摆放耗材错误,导致设备碰撞或试剂、时间损失。
 
  Figure 4. 向导式软件操作,IDT xGen® 杂交捕获试剂盒方法选择界面。
 
  Biomek自动化捕获测序——实践速度与通量的飞跃
 
  Figure 5. 完成 24/48/96个样本的自动化IDT xGen®杂交捕获测序文库制备预估耗时。

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