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高首鲟虹彩病毒PCR检测试剂盒反应液的配制方法

2020年10月08日 14:07人气：732 来源: 上海一研生物科技有限公司 >> 进入该公司展台

　　高首鲟虹彩病毒PCR检测试剂盒反应液的配制

　　PCR反应体系的配置方式有时也会影响反应的正常进行。常规方法与其它酶学反应一样，在后加入DNA聚合酶。早期的PCR仪没有带加热的盖子，要求在反应液上覆盖一层矿物油，防止水分蒸发。

　　对于使用具3’-5’外切活性的高温DNA聚合酶时，有时会扩增不出产物。在遇到这个问题时，如果将反应成分分开配制，A管含模板、引物和dNTP，以及调整体积的H2O，B管含缓冲液、DNA聚合酶和水，然后再将两管溶液混合起来，可较好地克服这个问题。

　　按照常规的方法配制反应体系，有时会出现非特异性扩增的问题。热启动(hotstart)PCR操作方式可较好解决这一问题。将dNTP、缓冲液，Mg2+和primer先配制好，然后加入一粒蜡珠(如AmpliWaxPCRQam100)，加热熔化，再冷却，使蜡将溶液封住，后加入模板和DNA聚合酶等剩余成分。只有当PCR反应进入高温阶段后，蜡层熔化，所有反应成分才会混合在一起。

　　已开封或者使用后，剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，ELISA检测试剂盒开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃，避免潮湿。

　　根据我司规定未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意，收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶液A、检测溶液B以及96孔板保存于-20℃。

（本文来源：上海一研生物科技有限公司，转载请注明出处）

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