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关于色谱仪缓冲液使用的一些基础知识

2019年02月26日 15:34人气：748

　　【中国仪器网使用手册】缓冲溶液指的是由弱酸及其盐、弱碱及其盐组成的混合溶液，能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸碱度的影响，从而保持溶液的pH值相对稳定，是色谱仪使用中非常重要的一部分。

　　关于流动相中缓冲盐的正确使用方法，主要有两部分。首先，使用前的处理。在使用缓冲盐作流动相之前需要用不含缓冲盐的流动相冲洗色谱柱，直至基线平稳。原则上，用于冲洗的流动相与分析时所用的流动相含水的比例相同(或含水更多)，不同的只是用于冲洗用的流动相中不含缓冲盐。其实，原因在于缓冲盐通常易溶于水，难溶于有机溶剂。用含缓冲盐的(特别是做流动相的水为饱和的缓冲盐溶液时)流动相进行分析时，如果分析前色谱柱中用于保存色谱柱的流动相中含水的比例相对较小，不先冲洗掉，接下来做样品的时候所用的流动相中如果有机溶剂含量大，而其比例中所含的水又不足以溶解该缓冲盐时，缓冲盐将会在色谱柱柱体上析出，沉积下来，对色谱柱造成损害。

　　其次是使用后处理，用与分析时含水比例相同的流动相进行约30min冲洗，直至基线平稳。如果该色谱柱在接下来很长的一段时间内不使用，要长期保存，则需再加上一步，即用纯的有机溶剂冲洗一遍，直至基线平稳。

　　此外，使用缓冲液时应该注意一下几点：

　　1、避免使用盐酸盐，盐酸盐对钢质有腐蚀作用。

　　2、缓冲液尽量要现配现用，往往缓冲液是良好的菌类培养液，隔天或放置长时间实验时会有很多怪现象发生。

　　3、实验后不可用有机溶剂直接过度，有机溶剂会处使盐类析出，造成液路或色谱柱堵塞，可用95：5的水甲醇冲洗。

　　4、使用缓冲液要及时掌握ph范围，做到胸中有数。

　　5、清洗液路和柱子时，有温控可加热到30摄氏度易于冲洗。

　　6、长时间用缓冲溶液要注意观察接头处有无析出，若有白色盐类析出，可考虑一定周期用10%硝酸冲洗一下液路(拆下柱子，走30ml,再用5倍水冲洗)可以避免液路的堵塞。

　　7、选择缓冲液要用可靠的试剂，避免不纯的盐类造成不必要的麻烦。

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