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夹芯式电泳槽的使用方法与注意事项

2017年03月14日 17:02人气:1109

  【中国仪器网 使用手册】所谓电泳,是指带电粒子在电场中的运动,不同物质由于所带电荷及分子量的不同,因此在电场中运动速度不同,根据这一特征,应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定量分析,或将一定混合物进行组份分析或单个组份提取制备,这在临床检验或实验研究中具有极其重要的意义。电泳仪正是基于上述原理设计制造的。下面简单介绍其使用方法及注意事项。
 

夹芯式电泳槽的使用方法与注意事项

  
  一、如何使用电泳槽
 
  夹芯式垂直电泳槽使用方法:
 
  1、组成部件
 
  (1)装有铂金丝的贮液槽一对,配有冷却装置及电泳缓冲液流出口。
 
  (2)凹型橡胶框,配有玻璃板,可分别制作厚度为lmm、1.5mm的凝胶板,操作时根据需要选择适当厚度的玻璃板及梳子配套使用。
 
  (3)样品孔模具(梳子)用于电泳加样。
 
  (4)固定贮液槽的螺丝杆及螺母4对,28D、30型为5对。
 
  (5)橡胶管五根。两根长的用于连接冷却水的出入口;中等长度的两根用于连接电极缓;中液的流出口;zui短的一根用于连接贮液槽间的冷却水。
 
  (6)导线1付。
 
  2、使用方法
 
  (1)清洗部件
 
  上述部件组装前要*清洗干净。尤其是玻璃板及凹形带槽橡胶框,必须用泡沫海绵沾少许肥皂粉或洗涤剂*清洗干净。清洗后的玻璃板应放在玻璃板支架上晾干水后方能使用。
 
  (2)组装电泳槽
 
  A、将四只固定螺杆插进一只贮液框(半上槽)的相应孔洞中,然后将贮液框仰放在桌上;
 
  左手拿凹型槽橡胶模框,右手的拇指与中指握住玻璃板的两侧边缘插到橡胶模框内 (注意手指不能接触灌胶面的玻璃板);
 
  将带有玻璃的橡胶模框子放在仰放的贮液槽框架上,其下缘必须对齐贮液槽框下缘;
 
  双手拿另一只贮液槽框与仰放在桌上的贮液槽框相合,并使橡胶框上的凸出线位于贮液槽有机玻璃框中央;
 
  装上四只螺母,拧紧螺丝。注意拧紧螺丝时用力应均匀,用双手按斜角位置双双逐渐拧紧;
 
  将电泳槽垂直竖起,放在桌上,带短玻璃板的贮液槽称上槽(阴),带长玻璃板的贮液槽称为下槽(阳),在长玻璃板与橡胶框间有一缝隙。此缝隙可用已熔化的10%琼脂沿长玻璃板下端灌入,为防止留存气泡,可稍抬起一端即可赶去气泡。待琼脂*凝固后才能灌胶。
 
  B、也可将槽垂直竖起,将带有玻璃的橡胶模框直接放入槽中,对称拧紧螺丝后,用琼脂封底边。
 
  3、灌胶
 
  (1)先灌分离胶,待凝固后再灌浓缩胶。灌胶前接通冷却水,夹紧连接上下贮液槽的两根橡胶管。
 
  (2)用细头滴管吸取胶液,沿长、短玻璃板中间缝隙从一端加入胶液。为防止产生气泡,可稍拾起另一端(气泡往高处走),不断加入胶液。若单层胶(分离胶)则加胶量约距离短玻璃板上端0.3厘米处,轻轻加少许水,双手轻轻将梳子插入,待胶凝后就可形成凹形加样孔。
 
  (3)为防止漏胶,在上、下贮液槽中立即加入蒸馏水,但蒸馏水不能超过短玻璃板上缘。
 
  (4)胶凝固后即可看到样品槽梳子与凝胶板间有一层折
 
  射率不同的亮区。
 
  4、加样
 
  (1)松开连接上、下贮液槽两根橡皮管上的夹子,放掉槽内的蒸馏水,待水流完后,再夹紧夹子。
 
  (2)双手轻轻取出样品梳子,即可看到界线清楚的加样孔,将孔中水分吸去(注意千万不要碰坏孔沿的字面)。
 
  (3)在上、下贮液槽中加入缓;中液,液体高度应超过上贮液槽短玻璃板上缘。
 
  (40用微量注射器吸取一定量的样品加到长、短玻璃板间的凹型凝胶样品孔内(注意加样动作要轻,针头不能碰坏胶面)。
 
  5、电泳
 
  一贮液槽导线与电泳仪的负极相连,下贮液槽导线与电泳仪的正极相连。检查线路无误,方可按照所要求的电压电流进行电泳。
 
  二、注意事项
 
  1、电泳仪通电进入工作状态后,禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分,也不能到电泳槽内取放东西,如需要应先断电,以免触电。同时要求仪器必须有良好接地端,以防漏电。
 
  2、仪器通电后,不要临时增加或拨除输出导线插头,以防短路现象发生,虽然仪器内部附设有保险丝,但短路现象仍有可能导致仪器损坏。
 
  3、由于不同介质支持物的电阻值不同,电泳时所通过的电流量也不同,其泳动速度及泳至终点所需时间也不同,故不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。
 
  4、在总电流不超过仪器额定电流时(zui大电流范围),可以多槽关联使用,但要注意不能超载,否则容易影响仪器寿命。
 
  5、某些特殊情况下需检查仪器电泳输入情况时,允许在稳压状态下空载开机,但在稳流状态下必须先接好负载再开机,否则电压表指针将大幅度跳动,容易造成不必要的人为机器损坏。
 
  6、使用过程中发现异常现象,如较大噪音、放电或异常气味,须立即切断电源,进行检修,以免发生意外事故。
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