细胞培养基在细胞培养过程中的应用和基本技术原理

　　细胞培养基是一种必bu可少的液体培养基，用于支持和扩展细胞在体外的生长。合成培养基种类很多，常用的有十多种，目前使用zui广泛的是RPMI 1640.MEM，DMEM和DMEM/F12.

　　RPMI 1640 培养基：最初为培养小鼠白血病细胞的需要而制备。开始的配方适合悬浮细胞的生长，主要针对淋巴细胞，后经几次改良从RPMI 1630.1634而至1640.其成分较为简单。现发现它适应于多种类型细胞的生长，包括肿瘤细胞以及很多正常组织细胞体外培养。

　　MEM 培养基：是zui低必需培养基，主要是贴壁细胞的培养，修改配方后也可用于其他类型细胞培养，例如如无钙(Ca)MEM培养基可被用于悬浮细胞的培养，而Hank’s平衡盐的MEM培养基可被用于二倍体细胞的培养。

　　DMEM 培养基：DMEM细胞培养基是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量，同时又分为高糖型(4500mg/L)和低糖型(1000mg/L)。而MEM中葡萄糖含量1000mg/L。低糖的酵母适合在7%以下的糖浓度中生存，而高糖的酵母适合在7%以上糖浓度中生存。DMEM-高糖型适合生长较快、附着性较差的肿瘤细胞，克隆细胞，也可用于DNA转染的转化细胞的培养;高糖型使细胞生长过快，不利于融合细胞的染色体稳定，做单抗细胞融合时，一般使用低糖型，DMEM-低糖型主要用于干细胞的培养。

　　DMEM/F12(1：1) 培养基：DMEM培养基营养成分浓度较高，F12培养液成分复杂，含有多种微量元素。DMEM和F12以1：1结合，称为DMEM/F12培养基，该培养基适用于血清含量较低条件下细胞培养，常用于细胞的克隆生长及干细胞培养。

　　Neurobasal：这是一种专为神经细胞设计的培养基，适用于神经元和神经胶质细胞的培养。

　　培养基的颜色主要是酚红来显示的，酚红指示颜色非常灵敏，p值范围为6-8.颜色由黄变为紫红。酚红不是必须的，在有些情况下甚至是多余的，酚红有类似固醇类激素的作用，如果涉及到固醇类激素相关的细胞培养，zui,好不要添加。但是为了培养方便，能让我们直观地感觉培养液的状况，加入酚红后，如果培养液偏酸了，就显示偏黄色，偏碱性了就显示偏紫色。另外在做流式细胞的时候，酚红会对结果产生影响，因此也不要添加。

　　在细胞培养过程中，检查培养液颜色和透明度变化，颜色变黄，说明pH下降;变红或紫红色，说明pH上升，细胞生长停滞、死亡，一般生长稳定的细胞2-3天换液一次，生长缓慢的细胞可3-4天换液一次。一旦新鲜的培养基中添加了血清和抗生素，建议1周内使用完。只有充分了解培养基，才能养好细胞!