Waters GPC凝胶色谱柱使用指导

你知道吗？

凝胶渗透色谱柱的使用寿命有限， 并且与其保养和使用状况直接相关。

样品和洗脱剂的污染、 频繁的溶剂更换、 操作和储存方法不当以及温度循环都会缩短色谱柱寿命。

那么问题来了，如何延长凝胶色谱柱的使用寿命？

今天，小编就来教大家如何正确使用Waters Styragel GPC柱。


                                        ·  Waters Styragel GPC柱
1、不要选择色谱柱的排阻上限值比您希望保留分离的最大分子所需的排阻上限还要大的色谱柱。如果希望测量分子量广泛分布时，使用混合柱床(mixed-bed)或扩展范围(extended-range)色谱柱是恰当的选择，这能够对所有分子量大小提供一致的分离能力。

2、为获得更好的分辨率和分子量测量准确度，建议串联2-3根高分辨率的窄分布色谱柱，可以同时兼顾宽分子量范围和高分辨率。

3、为获得最佳的分离度和最长的色谱柱寿命，各色谱柱的流速不得超过1.0 mL/min或反压超过3.5 MPa（500 psi，35 atm，以系统反压作校正）。

4、对于溶剂高效色谱柱，为获得最佳的分离度和最长的色谱柱寿命，各色谱柱的流速不得超过0.3 mL/min或反压超过3.5 MPa（500 psi，35 atm，以系统反压作校正）。这些色谱柱的正常流速为0.3 mL/min。

5、避免GPC柱受到机械冲击和振动。

6、尽量避免GPC柱温循环升降。

7、避免溶剂成分快速改变引起的反压的快速改变。

8、当转换到不同粘度的溶剂体系时,必须调整流速以确保系统的操作反压不超过3.5MPa(500psi，35atm)每柱。

9、避免溶解在流动相中的聚合物样品重新沉淀。

10、总是使用高质量的HPLC级溶剂。

11、GPC柱应该固定于某类应用，频繁更换样品和溶剂会缩短GPC柱的寿命，导致柱子分离度的降低。

12、串联连接色谱柱的时候，使用内径0.009英寸(0.25mm)U-字型柱连接管附件次第连接每一根柱。

13、注意色谱柱系列的顺序：

   一般情况下，分析结果与色谱柱组的排列顺序无关。但是，为了提高分离度并延长色谱柱寿命，请按照孔径依次减小的顺序排列色谱柱，推荐的接法是使孔径最大的色谱柱最靠近进样器。原因在于：

   *孔径越大的色谱柱越稳定且越能够耐受外来物质的积累。

   *样品中分子量最大的物质对样品的粘度影响最大。如果先分离分子量最大的物质， 那么粘度的下降速度会更快， 色谱柱组的压力将会更小。对于超高分子量的聚合物， 这种分离顺序有利于减小样品的剪切效应。


关于GPC柱的保存

01
如果您打算在24小时内再次使用色谱柱， 则无需进行特殊的保存。但是，应确保色谱柱不得变干。如果储存时间较长，请将色谱柱放回其包装盒中，并塞紧端塞进行储存。在没有溶剂流动的情况下，请勿将色谱柱置于高温环境中。

02
为获得最长的色谱柱寿命， 应避免温度循环变化。色谱柱未使用时， 应维持在运行温度， 并将流速降低至0.1 mL/min。

03
要重启色谱柱，将流速维持在0.1 mL/min，并且（ 如果适用）在10小时内将温度逐渐升高。然后将流速设置为所需的操作流速。