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*0F´ 感受态细胞

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*0F´ 感受态细胞 南京赛泓瑞生物在感受态细胞的研发方面,实力雄厚,拥有了克隆、表达、酵母和农杆菌4大类,共计百余种感受态细胞。在电击感受态方面,拥有了大肠杆菌 电转化感受态细胞和农杆菌电击感受态种类,*提高了客户在转基因以及文库构建方面的成功率。

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*0F`感受态细胞

*0F` Chemically Competent Cell
产品规格:

*0F10×100μl
pUC19(control vector)10pg/μl    10μl

      
*0F`感受态细胞基因组:
F´{lacIq Tn10 (TetR)} mcrA (mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80lacZM15 lacX74 recA1araD139 (ara-leu)7697 galU galK rpsL endA1 nupG
*0F`感受态细胞背景说明:
   CMbio *0F`菌株来源于*0菌株。将F`{lacIq Tn10 (TetR)}因子转入*0菌株,即为*0F`。该F`因子携带lacIq 抑制子,可抑制trctaclac等启动子下游基因的表达,从而可以用于一些表达毒性蛋白质粒的扩繁。recA1endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。CMbio *0F 可用于构建克隆,蓝白斑筛选(如用于蓝白斑筛选,需在培养基中加入IPTG诱导β-半乳糖苷酶基因的表达)实验,具有四环素抗性。CMbio High5TM系列*0F`感受态细胞经特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率>107cfu/μg
*0F`感受态细胞操作使用:

  1. CMbio *0F`感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手EP管底轻轻混匀,冰中静置25分钟。
  2. 42℃水浴热激60秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
  3.  向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YTLB),混匀后37℃200 rpm复苏60分钟。
  4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应 抗生素的2YTLB培养基上。
  5.  将平板倒置放于37℃培养箱12-16h,时间过长会产生假阳性小菌落。

*0F`感受态细胞注意事项:

  1.  CMbio 感受态细胞在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时 间过长,长时间存放会降低转化效率。
  2.  混入质粒或连接产物时应轻柔操作
  3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少终用于涂板的菌量。


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