Turbo感受态细胞 南京赛泓瑞生物在感受态细胞的研发方面,实力雄厚,拥有了克隆、表达、酵母和农杆菌4大类,共计百余种感受态细胞。在电击感受态方面,拥有了大肠杆菌 电转化感受态细胞和农杆菌电击感受态种类,*提高了客户在转基因以及文库构建方面的成功率。
Turbo
Turbo Chemically Competent Cell
Turbo感受态细胞基因型:
F' proA+B+ lacIqΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB) glnV galK16 galE15 R(zgb-210::Tn10) TetS endA1
thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5
Turbo感受态细胞简要说明:
Turbo 菌株是生长快的大肠杆菌菌株。-CMbio-
平板上 6.5 小时可见克隆,营养液中摇菌 4-6 小时可提取质粒,缺失核酸内切酶 (endA),提高了质粒 DNA 的产量和 质量;Turbo 菌株可严格控制 laclq 的表达,可以克隆毒性基因;fhuA2 突变赋予 Turbo 菌株对噬菌体 T1 的抗性;lacZ ΔM15 的存在使 Turbo 可用于蓝、白斑筛选。-CMbio-
-CMbio-Turbo 感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19 质粒检测转化效率>5×108 cfu/μg DNA。
Turbo感受态细胞操作说明:
1. Turbo 感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5 分钟后待菌块融化,加入目的 DNA(质粒或连接产物) 并用手
EP 管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置 25 分钟。-CMbio-
2. 42℃水浴热激 45 秒,迅速放回冰上并静置 2 分钟,晃动会降低转化效率。-CMbio-
3. 向离心管中加入 700 μl 不含抗生素的无菌培养基 (SOC 或 LB),混匀后 37℃,200 rpm 复苏 60 分钟。
4. 5000 rpm 离心一分钟收菌,留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 SOC 或 LB 培养基 上。-CMbio-
5. 将平板倒置放于 37℃培养 6.5 小时以上。-CMbio-
Turbo感受态细胞注意事项:
1. 感受态细胞在冰中缓慢融化。插入冰中 8 分钟内加入目标 DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降 低转化效率。-CMbio-
2. 混入目的 DNA 时应轻柔操作。-CMbio-
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少终用于涂板的菌量。-CMbio-
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