DH10Bac感受态细胞

DH10Bac感受态细胞 南京赛泓瑞生物在感受态细胞的研发方面，实力雄厚，拥有了克隆、表达、酵母和农杆菌4大类，共计百余种感受态细胞。在电击感受态方面，拥有了大肠杆菌 电转化感受态细胞和农杆菌电击感受态种类，*提高了客户在转基因以及文库构建方面的成功率。

DH10Bac感受态细胞
DH10Bac Chemically Competent Cell

DH10Bac感受态细胞基因型：
F- mcrA (mrr-hsdRMS-mcrBC)  80lacZM15 lacX74 recA1 endA1 araD139 ∆ (ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG /pMON14272 / pMON7124
DH10Bac感受态细胞简要说明：
CMbio DH10Bac感受态主要用于生产重组杆状病毒分子（Bac-to-Bac杆状病毒表达系统）。CMbio DH10Bac菌株中含有父本杆粒 bMON14272 、辅助质粒 pMON7124 ：父本杆粒 bMON14272包含 mini-F复制子, 卡那抗性基因, attTn7 位点和 lacZα互补因子；辅助质粒 pMON7124 含有 tnsABCD区（tnsABCD region supplies the transposition proteins required for insertion of the mini-Tn7 from the donor plasmid into its target site on the parent bacmid），具有四环素抗性，在细胞扩增过程中丢失，但可提高供体质粒pFastBac转化后的基因转座效率。mcrA、mcrBC及mrr突变使DH10Bac菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA（Therefore , genomic DNA , both  prokaryotic and eukaryotic, can be cloned efficiently in DH10Bac）。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。φ80dlacZ∆M15的存在使DH10Bac可用于蓝白斑筛选，CMbio High5^TM系列DH10Bac感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率>10⁸cfu/μg。
DH10Bac感受态细胞操作说明：

1. CMbio DH10Bac感受态细胞放置冰中融化（或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中），加入目 的DNA（质粒或连接产物）并用手EP管底轻轻混匀，冰上静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。

1.  向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养液（2YT或LB），混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少13h。
DH10Bac感受态细胞注意事项：

1.  CMbio 感受态细胞在冰上融化。
2.  混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
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