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F-BL21(DE3)感受态细胞

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F-BL21(DE3)感受态细胞 南京赛泓瑞生物在感受态细胞的研发方面,实力雄厚,拥有了克隆、表达、酵母和农杆菌4大类,共计百余种感受态细胞。在电击感受态方面,拥有了大肠杆菌 电转化感受态细胞和农杆菌电击感受态种类,*提高了客户在转基因以及文库构建方面的成功率。

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BL21感受态细胞

BL21 Chemically Competent Cell
产品编码:                          保存条件: -80℃   
产品规格:

BL2120×100μl
pUC19control vector10pg/μl            10μl

     
BL21感受态细胞基因型:
E. coli B F- dcm ompT hsdS(rB- mB-) gal [malB+]K-12(λS)
BL21感受态细胞简要说明:
 BL21是早开发的用于原核表达的菌株,BL21DE3)、RosettaOrigamiB(DE3) 等一系列原核表达菌株均来源于BL21菌株。该菌株主要用于非毒性蛋白的表达,不含T7 RNA聚合酶,所以不能用于由T7启动子驱动的蛋白表达(如:pET系列);但含有大肠杆菌RNA聚合酶,可以用于tactrc等使用大肠杆菌RNA聚合酶的原核系统的表达(如:pGEXpMAL质粒)。
 High5TM系列 BL21感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率达107cfu/μg
 
BL21感受态细胞操作说明:

  1.  100μl冰上融化的BL21感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。

2. 42℃水浴热激90秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

  1.  向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YTLB),混匀后37℃200rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YTLB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
BL21感受态细胞注意事项:

  1.   感受态细胞在冰上融化。
  2.  混入质粒时应轻柔操作。
  3.  转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。
  4.  诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。

 

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