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Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞

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Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞南京赛泓瑞生物在感受态细胞的研发方面,实力雄厚,拥有了克隆、表达、酵母和农杆菌4大类,共计百余种感受态细胞。在电击感受态方面,拥有了大肠杆菌 电转化感受态细胞和农杆菌电击感受态种类,*提高了客户在转基因以及文库构建方面的成功率。

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Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞


Rosetta-gami(DE3)pLysS Chemically Competent Cell

产品编码:                       保存条件: -80℃   
产品规格:

Rosetta-gami(DE3)pLysS20×100μl
pUC19control vector10pg/μl               10μl

 

Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞基因型:

Δ(ara-leu)7697ΔlacX74phoAPvuIIphoRaraD139ahpCgalEgalKrpsL(DE3)F[lac+lacIqpro]gor522
::Tn10 trxB pLysSRARE2 (CamR , StrR , Tet)

Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞简要说明:

 High5TM系列Rosetta-gami(DE3)pLysS 菌株聚合了不同原核表达菌株的优势:
 Rosetta-gami赋予其 RosettaOrigami的优点——补充大肠杆菌缺乏的种稀有密码子(AUA AGG AGA CUACCC GGA) 对应的tRNA,提高外源基因的表达水平,并且包含突变的硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase(trxB) 和*还原酶(glutathione reductase)(gor)基因,表达主要还原途径的两个关键酶。有利于形成正确折叠的含有二硫键的蛋白,增强蛋白的可溶性。

 该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶),适合T7启动子诱导的蛋白表达。

 该菌株携带的pLysS质粒含有表达 T7 *的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达,适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。Rosetta-gami(DE3)pLysS 菌株具有*,*,*,四环素抗性,经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg

 

Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞操作说明:

  1.  100μl冰上融化的 Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。

2. 42回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

  1.  向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YTLB),混匀后37℃200rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。


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