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T7表达感受态细胞

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T7表达感受态细胞南京赛泓瑞生物在感受态细胞的研发方面,实力雄厚,拥有了克隆、表达、酵母和农杆菌4大类,共计百余种感受态细胞。在电击感受态方面,拥有了大肠杆菌 电转化感受态细胞和农杆菌电击感受态种类,*提高了客户在转基因以及文库构建方面的成功率。

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T7表达感受态细胞基因型:

fhuA2 lacZ::T7 gene1 [lon] ompT gal sulA11 R(mcr-73::miniTn10--TetS)2 [dcm] R(zgb-210::Tn10--TetS) endA1 (mcrCmrr)114::IS10
 

T7表达感受态细胞简要说明:

  T7 Express菌株为大肠杆菌BL21增强型菌株,为Lon和OmpT蛋白酶缺陷型,主要适用于含有T7启动子的原核表达载体(如pET等)的蛋白表达,同样适用于需要大肠杆菌RNA聚合酶来转录RNA的非T7启动子的表达载体(如pGEX等)。该菌株区别于BL21(DE3)菌株的优势在于T7 RNA聚合酶基因整合在细菌染色体上的lac操纵子区域,基因组中无λ前噬菌体序列,并具有抗T1噬菌体感染等特点。T7表达感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率大于108 cfu/μg DNA。

T7表达感受态细胞操作说明:

  1.  100μl冰上融化的AngYuBio Rosetta(DE3)感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

  1.  向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YTLB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

T7表达感受态细胞其他*:

 

 

菌株抗性:对氨苄*,*,*,*,*和四环素敏感

 

T7表达感受态细胞储存条件:-70℃保存,避免反复冻融。


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