人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒（ELISA）
人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒产品详细
| 中文名称 | 人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒 ELISA |
| 英文名称 | Human Phospho Tau(181P) Assay Kit ELISA |
| 产品货号 | 27812 |
| 产品规格 | 96T |
| 检测样本 | 人脑脊液 |
| 适应物种 | 人 |
| 预期用途 | 用于检测人脑脊液里磷酸化Tau蛋白定性检测。 |
| 产品品牌 | 日本IBL |
| 供应商家 | 深圳市科润达生物工程有限公司 |
人磷酸化Tau蛋白ELISA试剂盒预期用途
人磷酸化Tau蛋白ELISA试剂盒用于检测人脑脊液里磷酸化Tau蛋白定性检测，仅供科研用，不用于临床诊断。
人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒成分
| 96T x 1 | 预包被板 |
| 0.4mL x 1 | 酶标记抗体: (30倍浓缩)HRP标记抗人Tau p181-RK27A6 小鼠IgG Fab’） |
| 0.5mL x 2 | 标准品:重组人Tau441 |
| 30mL x 1 | EIA缓冲液 |
| 12mL x 1 | 标记抗体稀释液 |
| 15mL x 1 | 显色剂 |
| 12mL x 1 | 终止液 |
| 50mL x 1 | 浓缩洗涤液 |
人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒检测原理
人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒是固相夹心ELISA（酶联免疫吸附测定）。当将弟一抗体包被在平板上时，将样品和标准品加入到板孔中进行弟一次反应。 反应后，加入HRP-缀合的二抗进入板孔进行第二次反应。 冲洗掉未结合的二抗后，将四甲基联本胺（TMB）加入孔中并显色。
人磷酸化Tau蛋白检测实验所需器材(但试剂盒没有提供)
| ★ | 酶标仪 |
| ★ | 微移液管及其枪头 |
| ★ | 量筒及烧杯 |
| ★ | 去离子水 |
| ★ | 冰箱(4°C) |
| ★ | 坐标纸(log/log) |
| ★ | 吸水纸 |
| ★ | 试管(用于标准品稀释) |
| ★ | 洗瓶 (用于洗板) |
| ★ | 孵育器（37±1℃） |
| ★ | 一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂) |
人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒储存条件
人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒在2-8℃保存，有效期见试剂盒外包装。
人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒实验步骤
使用前，将所有试剂应平衡至室温，大约30min，充分混匀，确保试剂质量无改变，标准曲线和样品检测必须同时进行.
1.确定样本空白孔，并加入100ulEIA缓冲液。
2.确定样本孔和标准品孔，样本和标准品（管1-7）100ul分别加入相应的孔中
3.盖板，弟一次孵育，
4.洗板，按照前述“操作注意事项”中第8-9条进行。使用稀释好的洗涤液，后在吸水纸上*拍干。
5.将每孔中加入100ul 准备好的标记抗体
6.盖板，第二次孵育
7.洗板，按照前述“操作注意事项”中第8-9条进行。使用稀释好的洗涤液，后在吸水纸上*拍干。
8.取需要量的底物液到一次性检测管中，每孔加入100ulTMB溶液。为了避免污染，检测管中剩余的底物液不得再次放回原底物液瓶中。
9.黑暗中室温孵育30min，颜色变蓝。
10.每孔加入100ul 终止液终止反应，通过点击板的一面来混合板内溶液，此时颜色变为黄色。
11.读取OD值：将板底污物清除，并保证板孔内无气泡，以空白孔为对照进行标准品和样本的测量。测量在450nm处进行，参考波长600-650nm，测量应在终止液加入后30min内进行。
人磷酸化Tau蛋白检测试剂盒检测步骤表格如下
| 试剂 | 待检测样品 | 标准品 | 样品空白 |
| 检测样品100ul | 稀释标准品（1-7管）100ul | EIA缓冲液 |
| 盖板，2-8°C下温育过夜 |
| 洗板4次（每孔加洗涤液不少于350ul，按操作注意事项中的8和9条进行 |
| 酶标抗体 | 100ul | 100ul | 100ul |
| 盖板，2-8°C下温育30min |
| 洗板5次（每孔加洗涤液不少于350ul，按操作注意事项中的8和9条进行 |
| 底物液 | 100ul | 100ul | 100ul |
| 室温避光温育30min |
| 终止液 | 100ul | 100ul | 100ul |
| 加终止液后,30min内于450nm/600-650nm处读取OD值， |
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