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LTD4 ELISA试剂盒

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LTD4 ELISA Kit白三烯D4(LTD4)酶联免疫吸附测定试剂盒 用途:该试剂盒用于体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组LTD4浓度。

详细信息 在线询价

LTD4  ELISA Kit白三烯D4(LTD4)酶联免疫吸附测定试剂盒

 

用途

该试剂盒用于体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分重组LTD4浓度。

LTD4  ELISA Kit白三烯D4(LTD4)酶联免疫吸附测定试剂盒  检测原理

本试剂盒采用竞争ELISA法。用LTD4抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的LTD4与包被的LTD4竞争*标记的抗LTD4单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,*与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,LTD4浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中LTD4的浓度。

反应类型竞争法
规格96T
反应时间2.5h
反应性通用
检测方法Colormetric
检测范围0.31-20 ng/mL
灵敏度0.19 ng/mL
样本体积50μL
样本类型血清、血浆或其他相关生物液体

特异性

可检测样本中的LTD4,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。

重复性

板内,板间变异系数均<10%。

LTD4  ELISA Kit白三烯D4(LTD4)酶联免疫吸附测定试剂盒  典型数据

由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

(ng/mL)O.DAverage
200.373 
0.431
0.402
100.5 
0.55
0.525
50.751 
0.741
0.746
2.51.097 
1.097
1.097
1.251.559 
1.549
1.554
0.632.02 
2
2.01
0.312.371 
2.383
2.377
02.849 
2.867
2.858

精密度

板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。

 Intra-assay PrecisionInter-assay Precision
Sample123123
n202020202020
Mean
(ng/mL)
1.002.909.301.002.7010.20
Standard deviation0.100.200.300.100.100.40
C V (%)10.006.903.2310.003.703.92

回收率

分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。

Sample TypeRange (%)Average Recovery (%)
Serum (n=5)86-9792
EDTA plasma (n=5)86-10093
Cell culture media (n=5)84-9990

线性

分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

  Serum (n=5)EDTA plasma (n=5)Cell culture media (n=5)
1:2Range (%)89-10487-10193-107
Average (%)969299
1:4Range (%)88-10189-103104
Average (%)9494104
1:8Range (%)92-10789-10394-107
Average (%)979699
1:16Range (%)91-10289-10197-110
Average (%)9694103

试剂盒组成及保存

未拆封的试剂盒可在4℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。

中文名称英文名称规格保存条件
ELISA酶标板(可拆卸)Micro ELISA Plate(Dismountable)8 孔×12 条-20℃,可存放6个月
冻干标准品Reference Standard2支
浓缩*化抗体(100×)Concentrated Biotinylated Detection Ab1支 120 μL
浓缩HRP酶结合物(100×)Concentrated HRP Conjugate1支 120 μL-20℃(避光),可存放6个月
标准品&样品稀释液Reference Standard & Sample Diluent1瓶 20 mL4℃.可存放6个月
*化抗体稀释液Biotinylated Detection Ab Diluent1瓶 14 mL
酶结合物稀释液HRP Conjugate Diluent1瓶 14 mL
浓缩洗涤液(25×)Concentrated Wash Buffer (25×)1瓶 30 mL
底物溶液(TMB)Substrate Reagent1瓶 10 mL4℃(避光)
反应终止液Stop Solution1瓶 10 mL4℃
封板覆膜Plate Sealer5 张 
产品说明书Product Description1 份
质检报告Certificate of Analysis1 份

说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

试验所需自备物品

  • 1.酶标仪(450nm波长滤光片)
  • 2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
  • 3.37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
  • 4.吸水纸

操作步骤

1.Add 50 μL of standard or sample to each well.

2.Immediay add 50 μL of Biotinylated Detection Ab to each well.

3.Incubate for 45 min at 37℃. Aspirate and wash 3 times.

4.Add 100 μL of HRP Conjugate to each well. Incubate for 30 min at 37℃. Aspirate and wash 5 times.

5.Add 90 μL of Substrate Reagent. Incubate for 15 min at 37℃.

6.Add 50 μL of Stop Solution.

7.Read the OD at 450 nm immediay. Calculation of the results.


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