Human TGF-beta1 ELISA Kit

Human TGF-beta1 ELISA Kit采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人 TGF-β1 单克隆抗体预包被在高 亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，经过孵育，样本 中存在的 TGF-β1 与固相抗体和检测抗体结合。

Human TGF-beta1 ELISA Kit检测原理：本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人 TGF-β1 单克隆抗体预包被在高 亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，经过孵育，样本 中存在的 TGF-β1 与固相抗体和检测抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶标 记的链霉亲和素(streptavidin-HRP)。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与 样本中 TGF-β1 的浓度成正比。加入终止液终止反应，在 450 nm 波长(参考波长 570 - 630 nm)测定 吸光度值。

Human TGF-beta1 ELISA Kit样本采集与贮存

细胞培养上清

离心沉淀之后即刻检测，或者分装，-20℃及以下贮存。避免反复冻融。 注意: 细胞培养基中的动物血清可能含有高浓度的潜隐 TGF-β1。为了获得的实验结果， 在 TGF-β1 测定试验中使用不含动物血清的细胞培养基。如果使用了含有动物血清的细胞培养基， 应该设立适当的对照，确定 TGF-β1 的基准浓度。

血清样本

血清分离管采集血清，室温凝集 30 分钟。2 - 8℃放置过夜，以便*释放 TGF-β1。1000 g 离心 10 分钟。吸取血清样本之后即刻检测，或者分装，-20℃及以下贮存。避免反复冻融。 尿液样本 无菌收集晨尿中段，1000 g 离心 10 分钟除杂。即刻检测，或者分装，-20℃及以下贮存。避 免反复冻融。 注意：未激活的尿液样本在 24 小时之内，不论是冷藏还是冷冻，表现 TGF-β1 浓度降低。样本的贮存条件和贮存期尽量保持*。

血浆样本

EDTA 作为抗凝剂，采血后 30 分钟之内，1000 g 离心 15 分钟收集血浆。推荐再增加一次离心， 2 - 8℃，10000 g 离心 10 分钟，*的去除血小板。即刻检测，或者分装，-20℃及以下贮存。避免反复冻融。 血小板颗粒中 TGF-β1 的释放取决于血小板的活化。因此，测定 TGF-β1 外周水平，应该收集 贫血小板的血浆样本，值得注意的是，临床实验室收集血浆样本的很多操作规范（美国临床实验 室标准委员会），都没有*的去除血浆样本中的血小板。这就导致因血小板活化释放 TGF-β1， 造成实验结果的变异和不可重复。推荐的血浆样本收集步骤，zui小化因血小板脱颗粒释放 TGF-β1 所带来的影响。然而，即使是的操作规范，也不能*去除某些血小板偶然脱颗粒。 注意：在分析前，冷冻样本应该缓慢的恢复至室温，轻柔的混匀。 

Human TGF-beta1 ELISA Kit灵敏度： 人 TGF-β1 的zui低可检测浓度为 3.36 pg/ml。 10 个零标准品浓度 OD 的平均值加上两倍 SD，计算zui低可检测浓度。