MCD021 HiCynth™三糖铁琼脂（微生物培养基）

HiCynth™三糖铁琼脂基于葡萄糖、乳糖和蔗糖发酵和硫化氢生产，用于鉴定革兰氏阴性肠杆菌。HiCynth™三糖铁琼脂（微生物培养基）

HiCynth™三糖铁琼脂（微生物培养基）

HiCynth™三糖铁琼脂基于葡萄糖、乳糖和蔗糖发酵和硫化氢生产，用于鉴定革兰氏阴性肠杆菌。

HiCynth™三糖铁琼脂（微生物培养基）

组成：

成分                       g/L

HiCynth™蛋白胨1号        16.000

HiCynth™蛋白胨6号         3.000

乳糖                       10.000

蔗糖                       10.000

葡萄糖                     1.000

氯化钠                     4.000

*                 3.000

硫酸铁                     0.200

枸椽酸铁铵                 0.300

*                     2.000

DL-蛋氨酸                  2.000

*                     1.000

酚红                       0.024

琼脂                       12.000

zui终pH值（25℃）         7.4±0.2

HiCynth™三糖铁琼脂（微生物培养基）

使用指导：

在1000ml蒸馏水中重悬64.52g培养基干粉。必要时加热以*溶解。混匀并转入试管中。高压灭菌（15磅121℃，15分钟）。使培养基斜面定型，并保留拖尾1英寸长。

说明：要得到更好结果，培养基可10磅115℃，15分钟灭菌。

原理和说明：

三糖糖琼脂zui初由Sulkin和Willett¹提出，并由Hajna²修改，用于鉴定肠杆菌。该培养基符合APHA的建议，用于检查肉类和食物产品³，用于检查牛奶和乳制品⁴和微生物限度试验，以确认其存在沙门氏菌^5,6和鉴定革兰氏阴性杆菌^6,7。HiCynth™三糖铁琼脂是采用不含动物和植物蛋白胨的化学限定成分，以避免动物蛋白胨带来的牛海绵状脑病（BSE）/传染性海绵状脑病（TSE）风险。

HiCynth™蛋白胨1号和HiCynth™蛋白胨6号提供必要的氮源和碳源的化合物、硫、微量元素和维生素B复合物，氯化钠维持培养基的渗透压平衡。乳糖，蔗糖和葡萄糖是可发酵的碳水化合物。*和亚铁离子形成H2S指示剂系统。酚红是pH指示剂。发酵葡萄糖的生物体产生各种酸，将培养基的颜色从红色变为黄色。管尾部（发酵）比斜面上（呼吸）有更多的酸释放。生长的细菌由于蛋白胨的氧化脱羧，产生碱性产物。这些碱性产物中和了在尾部产生的大量的酸。因此，孵育后的碱性（红色）斜面和酸性（黄色）尾部的出现，表明生物体对葡萄糖发酵，但不能发酵乳糖和/或蔗糖。除了葡萄糖之外，发酵乳糖或蔗糖（或两者）的细菌，产生大量的酸，而不会使该区域的pH反转，因此细菌表现出斜面产酸和尾部产酸。气体产生（CO2）是通过积聚的气体逃逸时，在培养基中存在裂纹或气泡来检测的。当通过几种细菌将硫代硫酸盐还原成硫化氢，并且硫化氢与铁盐中的铁离子结合生成不溶性黑色沉淀物硫化亚铁。硫酸氢钠的还原仅在酸性环境中进行。黑色只在试管尾部出现。HiCynth™三糖铁琼脂可和尿素琼脂/肉汤平行使用，用于区分沙门氏菌和变形杆菌。反应总结如下：

碱性斜面/酸性尾部——只有葡萄糖发酵

酸性斜面/酸性尾部——葡萄糖和蔗糖发酵或葡萄糖和乳糖发酵或所有三种糖葡萄糖、乳糖和蔗糖发酵。

气泡或裂缝存在——气体生产

黑色沉淀物存在——H2S气体生产

肠杆菌和产生H2S的沙门氏菌的一些成员在Hicynth™三糖铁琼脂上可能不是H2S阳性， 一些细菌可能在Kligler Iron HiCynth™琼脂上显示H2S生成，但不能在HiCynth™三糖铁琼脂上显示H2S生产。 这可能是因为在HiCynth™三糖铁琼脂中使用蔗糖，其结果抑制了细菌H2S产生的酶途径。

质量控制

外观

淡黄色至粉色均一松散粉末

成胶性

结实，相当于1.2%琼脂糖凝胶

制备的培养基颜色和透明度

粉红色透明溶液至轻微不透明凝胶，在试管内形成斜面

pH值（25℃）

7.20~7.60

培养反应

35℃-37℃孵育18-24小时

储存和保质期

30℃以下密闭保存。配好后的培养基2-8℃保存。在标签上的截止日期前使用。

参考文献：

1. Sulkin E.S. and Willett J.C., 1940, J. Lab. Clin. Med., 25:649.

2. Hajna A.A., 1945, J. Bacteriol, 49:516.

3. Downes F. P. and Ito K., (Eds.), 2001, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 4th Ed., APHA, Washington, D.C. 4. Wehr H. M. and Frank J. H., 2004, Standard Methods for the Microbiological Examination of Dairy Products, 17th Ed., APHA Inc., Washington, D.C.

5. Finegold S. M. and Baron E. J., 1986, Bailey and Scotts Diagnostic Microbiology, 7th Ed., The C.V. Mosby Co., St. Louis.

6. Eaton A. D., Clesceri L. S. and Greenberg A. W., (Eds.), 2012, Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 22nd Ed., APHA, Washington, D.C.

7. MacFaddin J., 1985, Media for Isolation-C*tion-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. 1, Williams and Wilkins, Baltimore