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一、前言
佐剂是疫苗的一种添加剂,当它先于抗原或与抗原混合注入机体后,能够增强机体对抗原的免疫应答或者改变免疫反应的类型,属于非特异性的免疫增强剂。随着现代生物技术和基因工程技术的迅速发展,针对不同疾病已开展了各种新型基因工程疫苗的研制,佐剂尤其是新型免疫佐剂的研究就显得尤为迫切。
在标准 T/CVDA02《复合矿物油动物疫苗佐剂》中,对于佐剂的质量检测中有明确规定测定羟值含量,本方法参考其中的检测方法制定了运用电位滴定检测的方法。该方法检测方便,减少了人为判断指示剂颜色对结果的误差影响,增加了检测精确度,并且提高了检测效率,解放操作员的双手。
二、仪器与试剂
2.1、仪器
JH-T6 全自动电位滴定仪,PH 复合电极,水浴锅,分析天平等。
2.2、试剂
酰化试剂(取对甲苯磺酸 14.4g, 置干燥的 500ml 具塞锥形瓶中,加醋酸乙酯 360ml,振摇使溶解,缓缓加入醋酐 120ml 摇匀,密塞,放置 3 日后备用),吡啶-水(3:5),氢氧化钾标准滴定液(1mol/L)。
三、实验方法
3.1、样品检测
准确称取 2g 左右样品,置于滴定杯中,加入 5mL 酰化试剂,封口膜密封,轻轻摇动至溶解。置于 50℃水浴加热 25min ,放冷,加吡啶-水(3:5)20mL ,5 分钟后用氢氧化钾标准滴定液(1mol/L),以 PH 复合电极为工作电极,在JH-T6上进行滴定至终点。同时做空白实验。
设定滴定仪参数如表 1 所示:
表 1 滴定参数设置
滴定模式: | 动态滴定 | 最小添加体积 | 0.02mL |
电极平衡时间: | 4s | 预搅拌时间: | 60s |
电极平衡电位: | 1mv | 滴定速度: | 标准 |
结束体积: | 10mL | 相关系数: | 12.69 |
电位突跃量: | 200 | 补液速度: | 5 |
搅拌速度: | 7 | 滴定前平衡电位: | 10mv |
3.2、图谱测试示例

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