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一、前言
佐剂是疫苗的一种添加剂,是能够非特异性地改变或增强机体对抗原的特异性免疫应答、发挥辅助作 用的一类物质。近年来为适应新型疫苗的需求,佐剂已经从传统、单一的形式向新型、多元化形式发展, 理想的佐剂不仅能够增强免疫反应,而且能使机体获得最佳的保护性免疫。为保证佐剂的品质,需要检测 其想用的指标,本实验参照《T/CVDA 复合矿物油动物疫苗佐剂》使用 JH-T6 全自动电位滴定仪对佐剂中皂化 值含量进行测定。
二、仪器与试剂
2.1、仪器
JH-T6 全自动电位滴定仪,PH 复合电极,分析天平,恒温水浴锅等
2.2、试剂
乙醇溶液,0.5mol/L 氢氧化钾-乙醇溶液液,0.5mol/L 的盐酸滴定液
三、实验方法
3.1 、试剂配置:
按照国标 GB/T 601 中氢氧化钾乙醇溶液的配置方法,量取 35mL 原液于 1000mL 容量瓶,用无水乙醇 滴定至稀释至 1000mL 刻度线,放置 2 天,吸取上清液备用。
同样按照 GB/T 601 配置 0.5mol/L 的盐酸溶液,量取 45mL 浓盐酸于 1000mL 容量瓶中,并用去离子水 稀释至 1000mL 刻度线。并按照国标GB/T 601 中规定,标定两个反应液的浓度。
3.2 、样品的制备及测试:
准确称取待测试样 2.5g,置于 250mL 锥形瓶中,用 25mL 移液管准确加入 25mL 配置好的氢氧化钾-乙 醇溶液,加热回流 30min,回流完成,加入 10mL 无水乙醇冲洗冷凝管的内壁,放置等待测试。
加制备完成的待测试样转移至滴定杯,将电极浸入溶液中,开启搅拌,搅拌均匀后,启动编辑好的方 法,点击开始滴定,用标定的盐酸标准溶液滴定样品,滴定至电位突跃终点,记下终点体积。同时做空白 试验。
3.3、仪器参数
JH-T6 全自动电位滴定仪参数设置如表 1 所示:
表 1 滴定仪参数设置
滴定模式: | 动态滴定 | 最小添加体积 | 0.01mL |
电极平衡时间: | 4s | 预搅拌时间: | 5s |
电极平衡电位: | 1mv | 滴定速度: | 标准 |
结束体积: | 20mL | 预滴定添加体积: | 8 |
突跃量: | 200 | 搅拌速度: | 10 |
预控 mv 值: | 无 | 滴定前平衡电位: | 6mv |
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