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如何用凯氏定氮仪检测大米蛋白质

解决方案 仪器网 2020年06月24日 13:24人气:0

  蛋白质含量是大米品质的指标之一。常用的检测蛋白质含量的凯氏定氮仪一般用于检测大豆、小麦和乳制品。凯氏定氮仪应该怎么检测大米的蛋白质含量呢?
 
  试剂:
 
  盐酸、氢氧化钠、浓硫酸、硼酸、甲基红:分析纯
 
  溴甲酚绿:指示剂
 
  尿素:99.9%
 
  全麦粉粗蛋白质标准物质
 
  铜催化剂:4.5 g K2SO4+0.5 g CuSO4﹒5H2O/片
 
  试剂配置:
 
  1.盐酸标准滴定溶液(0.1 mol/L) 按GB/T 601-2016配置及标定。
 
  2.氢氧化钠溶液(400 g/L) 称取4000 g氢氧化钠溶于水,冷却后稀释至10 L。
 
  3.硼酸吸收溶液(含溴甲酚绿和甲基红指示剂):
 
  (1) 1%硼酸:将100 g硼酸溶于10 L纯水中。
 
  (2) 0.1%溴甲酚绿溶液:0.1 g溴甲酚绿溶于100 mL95%乙醇中。
 
  (3) 0.1%甲基红溶液:0.11 g甲基红溶液100 mL溶于 95%乙醇中。
 
  (4)在10L1%的硼酸溶液中加人100 mL1%溴甲酚绿和70 mL 1%甲基红溶液混匀。
 
  试验方法
 
  1.样品制备 用中药粉碎机粉碎大米,并过100目篩。
 
  2.单因素试验 参考GB 5009.5- 2016及定氮仪简报,用消化炉消化样品,全自动凯氏定氮仪测定蛋白质。以蛋白质含量为指标,分别考察样品质量、浓硫酸添加量、消化温度、消化时间4个因素对大米蛋白质测定值的影响。
 
  3.正交试验 根据单因素试验结果选取合理水平设计正交试验。
 
  4.精密度及准确度试验 称取6个平行样品进行精密度试验,称取3个平行样品,加入尿素纯度标准物质进行加标回收试验,同时利用全麦粉粗蛋白质标准物质考察准确度。
 
  5.数据处理试验 数据用SPSS数据分析软件进行单因素方差分析并进行Duncan多重比较。
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