高效液相色谱流动相产生气泡应该怎么办
高效液相色谱作为一种常用的分析仪器在使用过程中经常会出现各种问题,其中流动相出现气泡就是比较常见的问题。流动相内的气泡会导致分析中基线噪声增大,甚至会影响分析的灵敏度导致无法进行分析。因此我们需要掌握流动相出现气泡的原因以及处理方法。
流动相产生气泡的原因是气体在液体中达到超饱和状态,溶液中溶解气体量超过饱和状态时的量,此时只要轻加振动或搅拌即会产生气泡。造成这种问题的情况主要有三种:
(1)温度升高
一般来说溶剂中能溶解气体的量随温度升高而降低。当溶剂从低温状态下移至高温时,能溶解气体的量降低,过量溶解的气体以气泡形式逸出。
(2)压力降低
气体的分压增高,气体在溶剂中的溶解量增大,在较高压力下达到饱和的溶液一旦压力下降将产生气泡。
(3)溶剂混合
气体的溶解量既与气体的种类有关也与溶剂的种类有关,极性低的气体较易溶解于低极性的溶剂。然而当两种不同的溶剂混合时,能容纳空气量往往要比各溶剂所能容纳空气的总量要小,这也要产生气泡。
解决方法:
1.采用各种脱气装置进行脱气,如抽真空脱气、超声振荡脱气、氦气或氮气脱气以及加热回流脱气和在线脱气机脱气等。
2.加热和搅拌。将流动相从低温储存室转到温度较高实验室时,或者可将流动相进行置于略高于室温的水浴中加热并搅拌以除去逸出的气体。
3.可采用提高流动相容器位置降低气泡的产生。将流动相容器置于比泵高的地方,使泵的入口处稍有压力,在压力下即使有气泡进入泵也占较小的体积,气泡体积小容易凭借吸液管中的浮力上浮,不易进入泵中。
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