蛋白质，你知多少？

没有蛋白质就没有生命

可见，蛋白质对人体的重要性。

蛋白质是组成人体一切细胞、组织的重要成分，

机体所有重要的组成部分都需要有蛋白质的参与。

一般说，蛋白质约占人体全部质量的18%，

重要的还是其与生命现象有关。

成人每天的蛋白质代谢情况

人体每天需要从食物中摄取正常值的蛋白质，

维持身体正常机制的运行。

蛋白质常在体液或等渗缓冲液中再悬浮。然而，在这种高导电性溶剂上用电泳光散射(ELS)测量zeta电位可能会导致产生过量热量，进而造成样品降解和电极损伤。本文中，我们使用稳定且可重复使用的Univette样品池和Litesizer™500来测量溶解在等渗缓冲液中的标准蛋白溶菌酶的zeta电位。由于cmPALS技术和蛋白模式，该模式可以使测量过程短暂中断，使样品冷却下来，能够在不造成电极损伤的情况下获得高重复性的zeta电位测量结果。

简介

Zeta电位与粒子间斥力有关，通常表征粒子悬浮液特性必需测量zeta电位。虽然很多物质可以溶解或分散在去离子水中，但有些粒子需要分散在高导电性的溶剂中才能保持其结构，不会降解。这在生物样品中尤其常见，因为蛋白质、生物医学聚合物和细胞必须溶解在缓冲液或等渗缓冲液中。

利用电泳光散射(ELS)来测量zeta电位，这意味着在样品上应用了电场。这种测量技术的常见弊端是所谓的焦耳热，即电流通过导体(样品)会产生热量。样品的电导率越高，产生的热量越多，这可能会导致样品降解和电极损伤。这个问题对于生物样品来说更为严重，因为生物样品需要高导电性的溶剂，并且对热解非常敏感。

因此，对于这样的样品，关键是要保持尽可能低的电流，并使用尽可能短的测试时间。Anton Paar的Litesizer™500，*的cmPALS技术可以在较低的电压和较短的测量时间内实现稳定灵敏的zeta电位测量，从而降低敏感样品的应力。此外，用户可以激活一个称为“蛋白模式”的软件功能，它会在测量zeta电位时引入短暂的中断，从而使样品冷却下来。

Univette是一种可重复使用的样品池，可用于在高导电性或有机溶剂中测量zeta电位，它足够坚固，可以承受这种条件，并且不会造成电极损伤。

本文我们演示了Litesizer™500和Univette的联用性能，即使用Kalliope™的蛋白模式来测量标准蛋白溶菌酶在高导电性溶剂中的zeta电位。

实验方法

用卵清蛋白(Sigma-Aldrich)制备了两种不同的溶菌酶溶液：

• 0.1 mg/mL，溶于10 mM BisTris 缓冲液 (Carl Roth)和50 mM NaCl (J.T. Baker) 1：1的混合物中。

• 1.0 mg/mL，溶于磷酸盐缓冲液(PBS，Sigma-Aldrich)中。

向Univette石英样品池中加入900 μL样品。Di一次测量的平衡时间设置为2分钟，连续测量30秒。每个溶液测试3个独立样本，每个样本重复4次，共测试12次。表1总结了测量的输入参数。