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高速逆流色谱操作步骤

2018年09月27日 14:14人气：970

　　【中国仪器网使用手册】高速逆流色谱是20世纪80年代发展起来的一种连续的液—液分配色谱分离技术，它不用任何固态的支撑物或载体。仪器利用两相溶剂体系在高速旋转的螺旋管内建立起一种特殊的单向性流体动力学平衡，当其中一相作为固定相，另一相作为流动相，在连续洗脱的过程中能保留大量固定相。

　　今天小编就带大家了解一下高速逆流色谱的操作步骤。

　　1. 配液。超声脱气约20min，脱气后静置冷却至室温后泵液。

　　2. 打开恒温水浴，将温度升至设定温度。

　　3. 泵固定相。以10～20ml/min流速泵入固定相，检测器出口端流出固定相约20～50ml后停泵。

　　4. 平衡。打开紫外检测器开始预热，正转转动主机至900rpm(FWD为正转，REV为反转)，同时以3ml/min流速泵入流动相，至出口端流出流动相且此时紫外信号稳定，体系基本已平衡。

　　5.进样。以体系上下相溶解一定量的样品，超声溶解均匀后，在装样注射器中倒入样品溶液，将进样六通阀切换至load，推排气泡后吸液至样品全进入进样圈中，将load切换至inject，检测器、工作站调零开始记录。

　　6. 接收流分。工作站记录，设备运行时间为500min，保存后采集数据，保存。

　　7.清洗。断开泵与主机的连接，将主机进口与气管出口连接，吹气；将主机中溶剂吹出后，泵入约50ml清洗液，吹气，重复此过程2～3次；后一次长时间(1小时左右直至吹干)吹气时将主机内液体吹尽。

　　8.关机。

　　高速逆流色谱相对于传统的固—液柱色谱技术，具有适用范围广、操作灵活、、快速、制备量大、费用低等优点。目前广泛应用于生物医药、天然产物、食品和化妆品等领域，特别在天然产物行业中已被认为是一种有效的新型分离技术;适合于中小分子类物质的分离纯化。

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