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组织研磨机对提取动物关节软骨组织总RNA

2023年03月13日 17:19人气：182 来源: 杭州聚同电子有限公司 >> 进入该公司展台

实验目的
研磨破碎软骨组织（大鼠膝关节软骨），提取其总RNA。

实验原理
充分磨碎软骨样品（大鼠膝关节软骨），再用相关试剂提取其总RNA。

实验材料和器具
样品：大鼠膝关节软骨
仪器：多样品组织研磨仪
耗材：研磨罐，研磨珠
试剂：液氮若干

实验步骤
1.研磨软骨组织
1.1 取适量大鼠膝关节软骨组织，剪切成约1立方厘米小块；
1.2 将小块软骨组织置于液氮中2分钟或放入-80度冰箱冷冻30分钟；
1.3 将样品和研磨珠放入研磨罐中，盖好盖子；
1.4 将装好样品及钢珠的研磨管，放入已经在-20度冰箱预冷好的适配器中，加入变性液，β-巯基乙醇；
1.5 将适配器放入净信研磨仪中，在14单位频振条件下，研磨1min，可得到匀浆状的软骨组织；
2.总RNA提取
2.1 冰水浴下，加酸性水饱和酚，摇匀，加醋酸钠，氯fang、异戊醇混合液，冰水浴上15min；
2.2 4℃下，离心，取上清液，加氯fang、异戊醇混合液，离心取上清，加异丙醇，-20℃下沉淀，离心，得到凝胶状RNA和蛋白多糖混合沉淀，加无RNA酶水，溶解得胶状溶液；
2.3 取胶状溶液用plant RNAout试剂盒的RNA提取步骤得到总RNA沉淀，取沉淀，乙醇洗涤后用无RNA酶水溶解沉淀，即得关节软骨组织总RNA溶液。

（本文来源：杭州聚同电子有限公司，转载请注明出处）

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