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同时分离注射液中 12 种水溶性和脂溶性维生素（LC-UV）

2021年01月22日 15:19人气：922 来源: 赛默飞色谱及痕量元素分析 >> 进入该公司展台

　　引言：维生素是人和动物为维持正常的生理功能而必需从食物中获得的一类微量有机物质，在人体生长、代谢、发育过程中发挥着重要的作用，在食品、保健品及药品中的测定也变得越来越频繁。维生素是个庞大的家族，目前所知的维生素就有几十种，大致可分为脂溶性和水溶性两大类。高效液相色谱法作为一种快速分离、能同时测定多种物质的仪器分析方法，在多种维生素同时测定方面具有*的优势。但是由于水溶性维生素和脂溶性维生素性质差异很大，所以很少将其在同一个方法里进行检测。

　　本方法采用 Thermofisher 的针对极性化合物有特殊选择性的 Acclaim PolarAdvantage II C18 色谱柱，可以很有效的将 9 种水溶性维生素得到很好的保留和分离，同时能够在大有机相存在的情况下，对脂溶性维生素得到很好的洗脱和分离，实现了一个方法解决两类性质差异很大的维生素的同时分离。

　　仪器配置 Thermo Ultimate 3000 系统：泵：DGP-3600 自动进样器：WPS-3000SL 柱温箱：TCC-3000 检测器：DAD-3000 色谱软件：Chromeleon 7.1

　　测定条件分析柱： Acclaim PolarAdvantage II C18, 4.6×250mm, 5µm, PN: 063199, SN: 001461 流动相： A：0.025%TFA 的水；B：乙腈；C：甲醇；梯度见表 1. 进样量：10µL 柱温：室温检测器波长：见表 2.

　　样品处理按照注射液冻干剂说明要求，向其中加入 5mL 超纯水，使其充分溶解，将溶解后的注射液通过 0.22 μm 尼龙滤膜过滤后，使用超纯水稀释 10 倍，待测。

　　实际样品分析按照样品处理方法测定了注射液样品，测定结果如下：

　　讨论与建议：本实验针对注射液的特点，将 9 种水溶性维生素和 3 种脂溶性维生素放在同一个分析方法里进行检测，从结果中可以看到分析结果良好。而因为水溶液中维生素C不稳定，所以有随着时间推移峰面积减少的现象，所以推荐对于维生素 C 的分析需要现做现配样品。因为水溶性维生素比较易溶于水，而脂溶性维生素必须溶解在有机溶剂里，而且如果有机溶剂中出现比较少的水也会导致脂溶性维生素的析出以及影响水溶性维生素中四水合辅羧酶、核黄素和烟酰胺的峰形，所以标准品中分别将水溶性维生素和脂溶性维生素分开混合测量。因为样品为冻干剂，且按照使用要求 5mL 超纯水溶解后依然浓度很高，所以再次将样品稀释 10 倍后进行分析。

（本文来源：赛默飞色谱及痕量元素分析，转载请注明出处）

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