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一招教会你如何使用分光光度计

2020年11月26日 23:17人气:2057 来源: 南京信帆生物技术有限公司 >> 进入该公司展台

  一招教会你如何使用分光光度计
 
  使用分光光度计的步骤与方法
 
  1.预热仪器:
 
  为使测定稳定,将电源开关打开,使仪器预热20min,为了防止光电管疲劳,不要连续光照。预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开,使光路切断。
 
  2.选定波长:
 
  根据实验要求,转动波长调节器,使指针指示所需要的单色光波长。
 
  3.固定灵敏度档:
 
  根据有色溶液对光的吸收情况,为使吸光度读数为0.2~0.7,选择合适的灵敏度。为此,旋动灵敏度档,使其固定于某一档,在实验过程中不再变动。一般测量固定在“1”档。
 
  4.调节“0”点:
 
  轻轻旋动调“0”电位器,使读数表头指针恰好位于透光度为“0”处(此时,比色皿暗箱盖是打开的,光路被切断,光电管不受光照)。
 
  5.调节T=100%:
 
  将盛蒸馏水(或空白溶液或纯溶剂)的比色皿放入比色皿座架中的第1格内,有色溶液放在其它格内,把比色皿暗箱盖子轻轻盖上,转动光量调节器,使透光度T=100%,即,表头指针恰好指在T=100%处。
 
  6.测定:
 
  轻轻拉动比色皿座架拉杆,使有色溶液进入光路,此时表头指针所示为该有色溶液的吸光度A,读数后,打开比色皿暗箱盖。
 
  7.关机:
 
  实验完毕,切断电源,将比色皿取出洗净,并将比色皿座架及暗箱用软纸擦净。
 
  分光光度计的检验小妙招
 
  1.波长准确度的检验:
 
  分光光度计在使用过程中,由于机械振动、温度变化、灯丝变形、灯座松动或更换灯泡等原因,经常会出现刻度盘上的读数与实际通过溶液的波长不符合的现象,因而导致仪器灵明度降低,影响测定结果的精度,需要进行检验。
 
  检验波长准确度简-单的方法是用干涉滤光片或镨钕滤光片测量仪器的吸收峰值, 如果测出的值与滤光片标准值之差超出规程规定,则需要进行波长调节。
 
  2.透射比正确度的检验:
 
  用透射比标准值分别为10 %、20 %、30 %左右的光谱中性滤光片,可见光区分别在440、546、635nm波长处,以空气为参比,分别测量各滤光片的透射比,紫外光区用重铬酸钾溶液分别在235、257、313、350nm波长处,以高氯酸溶液为参比,测量其透射比。
 
  3.稳定度的检验:
 
  在零点不受光的条件下,用零点调节器将仪器调至零点,观察3分钟读取透射比的变化,即为零点稳定性。在仪器测量范围两端向中间靠10nm处,调节零点后,盖上样品室盖(打开光门),使光电管受光,调节透射比为95%(数显仪器调至100%)察3分钟读取透射比的变化,为光电流稳定性。
 
  4.光的检验:
 
  可见分光计棱镜式仪器在420nm处,光栅式仪器在360nm处,紫外分光计在220nm处分别用符合规定的截止滤光片,以空气为参比,测量其透射比值,即为仪器在相应波长下的杂散辐射率。
 
  分光光度计的维护和保养
 
  分光光度计是精密仪器,正确安装、使用和保养对保持仪器良好的性能和保证测试的准确度有重要作用。
 
  1.对仪器工作环境的要求
 
  分光光度计应安装在稳定的工作台上,(周围不应有强磁场, 以防电磁干扰),室内温度应保持在(10~30)℃。室内应干燥,相对湿度宜控制在<85 %,室内应无腐蚀性气体,光线不宜过强。
 
  2.仪器保养和维护方法
 
  (1)仪器工作电压一般为220V,允许±10 %的电压波动。为保持光源灯和检测系统的稳定性,在电源电压波动较大的实验室配备稳压器。
 
  (2)为了延长光源使用寿命,在不用时不用开光源灯。如果光源灯亮度明显减弱或不稳定,应及时更换新灯。更换后要调节好灯丝位置,不要用手直接接触窗口或灯泡,避免油污沾附,若不小心接触过,要用无水乙醇擦拭。
 
  (3)单色器是仪器的核心部分,装在密封盒内,不能拆开,为防止色散元件受潮发霉,必须经常更换干燥剂。
 
  (4)必须正确使用吸收池,保护吸收池光学面。
 
  (5)光电转换元件不能长时间曝光,应避免强光照射或受潮积尘。
 
  使用分光光度计都有什么注意事项?
 
  1)为了防止光电管疲劳:
 
  不测定时必须将比色皿暗箱盖打开,使光路切断,以延长光电管使用寿命。
 
  2)比色皿的使用方法:
 
  ①拿比色皿时:
 
  手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。
 
  ②清洗比色皿时:
 
  一般先用水冲洗,再用蒸馏水洗净。如,比色皿被有机物沾污,可用盐酸-乙醇混合洗涤液(1:2)浸泡片刻,再用水冲洗。不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗比色皿,以免损坏。也不能用毛刷清洗比色皿,以免损伤它的透光面。每次做完实验时,应立即洗净比色皿。
 
  ③比色皿外壁的水用擦镜纸或细软的吸水纸吸干:
 
  以保护透光面。
 
  ④测定有色溶液吸光度时:
 
  一定要用有色溶液洗比色皿内壁几次,以免改变有色溶液的浓度。另外,在测定一系列溶液的吸光度时,通常都按由稀到浓的顺序测定,以减小测量误差。
 
  ⑤在实际分析工作中:
 
  通常根据溶液浓度的不同,选用液槽厚度不同的比色皿,使溶液的吸光度控制在0.2~0.7。
 
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