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LH-20 填料

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LH-20 填料
Sephadex LH-20尤其适用于天然产物在有机溶剂中的纯化。例如:类固醇、萜类、脂类以及小分子多肽等,Sephadex LH-20同时适用于分子类别非常相似的物质的分离和工业规模的制备,既可用于初步纯化步骤,也可用于终精制步骤,如非对映同分异构体的分离。

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LH-20 填料

Sephadex LH-20填料用于预备纯化天然产物,如类固醇、萜类、脂质和低分子量肽。

  全称为:羟丙基葡聚糖凝胶。常用商品凝胶的一种(另一种为交联葡聚糖凝胶Sephadex G)。Sephadex LH-20为Sephadex G-25(葡聚糖凝胶按交联度分类的其中一种商品型号)经羟丙基化处理后得到的产物,此时,葡聚糖凝胶分子中的葡萄糖部分将与羟丙基结合成下列醚键形式: -OH → -OCH2CH2CH2OH

  与Sephadex G比较,Sephadex LH-20分子中 -OH 基总数虽无改变,但碳原子数所占比例却相对增加了,所以Sephadex LH-20不仅可在水中应用,也可在极性有机溶剂或他们与水组成的混合溶剂中膨润使用。

    Sephadex LH20是一种价钱较高的填料,特点: 1、适合用有机溶剂分离嗜脂性分子,可以非常经济地大规模制备各种天然产物 2、结合凝胶过滤、分配色谱及吸附性层析于一身,分离结构非常相近的分子 3、载量可高达300mg样品/ml凝胶,极少需要再生,分离效果可保持十几年不变。


原理:

    Sephadex LH-20的分离原理是根据分子大小,主要有两方面:以凝胶过滤作用为主,兼具反相分配的作用(在反相溶剂中)。因为凝胶过滤作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脱下来,小分子的化合物保留强,最后出柱。如果使用反相溶剂洗脱, Sephadex LH20对化合物还起反相分配的作用,所以极性大的化合物保留弱,先被洗脱下来,极性小的化合物保留强,后出柱。如果使用正相溶剂洗脱,这主要靠凝胶过滤作用来分离。


洗脱溶剂:

     Sephadex LH-20 洗脱溶剂因分为两类:反相和正相两种。用得最多的是反相溶剂洗脱,以氯仿/甲醇溶解,过滤后,湿法上样。






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