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18064-022 反转录酶

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产品名称: Superscript II Reverse
反转录酶
货号: 18064-022
规格: 2000U
描述:(reverse transcriptase,也可写成逆转录酶) 又称为依赖RNA 的DNA 聚合酶。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中发现了一种特殊的DNA 聚合酶,该酶以RNA

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反转录酶(reverse transcriptase,也可写成逆转录酶) 又称为依赖RNA 的DNA 聚合酶。1970 年Temin 等在致癌RNA 病毒中发现了一种特殊的DNA 聚合酶,该酶以RNA 为模板,以dNTP 为底物,tRNA( 主要是*tRNA) 为引物,在tRNA 3'-OH 末端上,根据碱基配对的原则,按5'-3'方向合成一条与RNA 模板互补的DNA 单链,这条DNA 单链叫做互补DNA (complementary DNA,CDNA)。

(Reverse transcripatse)是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA(cDNA)的酶。哺乳类C型病毒的转录酶和鼠类B型病毒的逆转录酶都是一条多肽链。鸟类RNA病毒的逆转录酶则由两上亚基结构。真核生物中也都分离出具有不同结构的转录酶

转录酶都具有多种酶活性,主要包括以下几种活性 。

①DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为*的tRNA,在引物tRNA3′-末端以5′→3′方向合成DNA。转录酶中不具有3′→5′外切酶活性,因此没有校正功能,所以由转录酶催化合成的DNA出错率比较高 。

②RNase H活性;由转录酶催化合成的cDNA与模板RNA形成的杂交分子,将由RNase H从RNA5′端水解掉RNA分子 。

③DNA指导的DNA聚合酶活性;以反转录合成的di一条DNA单链为模板,以dNTP为底物,再合成第二条DNA分子。

除此之外,有些转录酶还有DNA内切酶活性,这可能与病毒基因整合到宿主细胞染色体DNA中有关。逆转录酶的发现对于遗传工程技术起了很大的推动作用,目前它已成为一种重要的工具酶。用组织细胞提取mRNA并以它为模板,在逆转录酶的作用下,合成出互补的DNA(cDNA),由此可构建出cDNA文库(cDNa library),从中筛选特异的目的基因,这是在基因工程技术中常用的获得目的基因的方法 


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