小鼠趋化因子 C-C-基元配体 2elisa试剂盒

【货号】YKE30021
【产品名称】
通用名称：小鼠趋化因子 C-C-基元配体 20 定量检测试剂盒（ELISA） 英文名称：Mouse Chemokine C-C-Motif Ligand 20 （CCL20）ELISA Kit
【包装规格】96 人份/盒
【预期用途】
仅供科研使用，定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中 CCL20 的浓度。

【检验原理】

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗小鼠 CCL20 单克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和*化的检测抗体，经过孵育，样本中存在的 CCL20 与固相抗体和检测抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(streptavidin-HRP)。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中 CCL20 的浓度成正比。加入终止液终止反应，在 450 nm 波长(参考波长 570 -630 nm)测定吸光度值。

【检测步骤】

检测之前请将所有的试剂、样本平衡至室温。

1. 准备好所有需要的试剂及工作浓度标准品。

2. 将不需要的板条拆卸下来，放回装有干燥剂的铝箔袋，重新封好封口。

3. 加入 300 μl1×洗液静置浸泡 30 秒。为了获得理想的实验结果浸泡是必须的。弃掉洗液之后，在吸水纸上将微孔板拍干。洗板完成之后，请立即使用微孔板，不要让微孔板干燥。

4. 复孔加入 100 μl2 倍倍比稀释的标准品。

5. 样本孔加入 50 μl 1×检测缓冲液和 50 μl 样本。保证连续加样，不要间断。加样过程在 15 分钟内完成。

6. 每孔加入 50 μl 稀释的检测抗体。

7. 使用封板膜封板。300 转/分钟振荡，室温孵育 2 小时。

8. 弃掉液体，每孔加入 300 μl 洗液洗板，洗涤 6 次。每次洗板，在吸水纸上拍干。为获得理想的实验性能，必须*移除残留液体。

9. 每孔加入 100 μl 稀释的辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素。

10. 使用新的封板膜封板。300 转/分钟振荡，室温孵育 45 分钟。

11. 重复步骤 8。

12. 每孔加入 100 μl 显色底物 TMB，避光，室温孵育 5 -30 分钟。

13. 每孔加入 100 μl 终止液。颜色由蓝色变为黄色。如果颜色呈现绿色或者颜色的变化明显不均匀，请轻轻叩击板框，充分混匀。

【检验方法的局限性】

1、仅供科研使用，不得用于临床诊断。

2、在试剂盒标示的有效期内使用，过期产品不得使用。

3、跟其他厂家的试剂盒或者组分不能混用。

4、使用试剂盒配套的样品稀释液。

5、请将样本适当稀释后，再重新测定。

6、待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果，检测前，请排除该因素。

7、通过其他方法得到的检测结果，与本试剂盒测定结果不具有直接的可比性。