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EIA5049 类胰岛素生长因子结合蛋白3ELISA试剂盒

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类胰岛素生长因子结合蛋白3ELISA试剂盒用于体外定量测定人血清中胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)的含量。

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类胰岛素生长因子结合蛋白3测定试剂盒(酶联免疫吸附法)

ELISA操作加样过程常见问题及解答

1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;

  1. 其他样本的处理不当,导致加样不准;
  2. 加样时,不同标准品或样本不更换枪头;
    4)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时);
    5)加样尤其是加底物液和终止液时,顺序不*,导致样本显色时间不*。
    解决办法:
    1) 标本为血清:将血液先自然存放 1-2 小时后,再用 3000rmp 离心 15 分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合 5-10 次,放置一段时间后,3000rpm 离心 15 分钟;若在几天内检测,可放在 2-8℃ 冰箱中,若要贮存,则置于-20℃ 的低温冰箱内。

2) 若样本不是常规样本,应按照不同样本的处理方法先行处理样本,终使用清澈的样本进行检测;(详见我公司常用样本处理技术文章)
3)加样时,不同的标准品,质控品和样本分别使用不同的枪头,避免交叉污染

加样后及时放入孵箱;标本较多时,请分批操作;
5) 加酶或底物液,终止液时按照前后*的顺序加样,保证每个样本反应的时间*。为了缩短反应时间,可采用多道移液器进行。

通用名称:类胰岛素生长因子结合蛋白3测定试剂盒(酶联免疫吸附法)
英文名称:IGFBP-3 ELISA

公司品牌:德国DRG
产品货号:EIA5409
产品规格:96T
检测样本:血清
储存条件:2-8℃
检测方法:ELISA
预期用途:用于体外定量测定人血清中胰岛素样生长因子结合蛋白-3的含量
供应商家:深圳市科润达生物工程有限公司


类胰岛素生长因子结合蛋白3ELISA试剂盒产品规格
96T


类胰岛素生长因子结合蛋白3ELISA试剂盒预期用途
      IGFBP-3 试剂盒用于体外定量测定人血清中胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)的含量。
IGFBP-3 前言简介
      胰岛素样生长因子(IGF)系统是正常体内生长和再生的主要调节因子,影响细胞增殖,分化和细胞凋亡。 此外,IGF-系统似乎改变胰岛素敏感性和*性葡萄糖代谢。 后,许多流行病学,实验和临床资料表明,IGF-系统也涉及几种常见癌症的发展以及常见疾病如动脉粥样硬化和2型糖尿病等。
     IGF家族由一系列密切相关的多肽组成,其包括两个主要促进生长的多肽,IGF-I和IGF-II,6种特异性高亲和力IGF结合蛋白(IGFBP-1至-6)和一个大的非IGF结合糖蛋白,“酸不稳定亚单位”(ALS)。
IGFBP-3是较丰富的IGF结合蛋白,占健康人循环IGF结合能力的75%以上。 IGFBP-3与IGFBP-5共享功能特性,因为两种肽都能与ALS和IGF-I或-II的形成高分子量约150千道尔顿的三元复合物。 然而,IGFBP-5循环浓度比IGFBP-3低得多,而在健康受试者中,三元复合物携带多达90%的IGFBP-3但只有约50%的IGFBP-5。
     初IGFBP被认为是IGF-载体蛋白,稳定血浆IGF水平并控制IGF从循环中流出至血管外隔室。此外,人们认为 IGFBP复合IGF在生物学上或多或少无活性,被剥夺了与IGF-1受体相互作用的能力。但是,很快人们就发现,在一些实验设置中,IGFBP激活而不是抑制IGF-I介导的作用,因此,IGFBP通常被称为IGF-1生物活性的调节剂。另外,大多数的IGFBP,特别是IGFBP-3,发挥着IGF-I和IGF-I受体的独立作用,可能涉及位于细胞表面和细胞内的特定受体间的相互作用。例如,IGFBP-3现在被认为是作为抗癌分子服务的,它可以明显防止几种常见的癌症,同时IGFBP-3在培养的脂肪细胞中对胰岛素信号的传导作用也被提出。
     三元复合物的转换非常缓慢,一天中IGFBP-3的血浆浓度始终保持稳定,而不受短期营养变化的影响。 因此,IGFBP-3的水平可以由一个单独测  量确定。 GH是IGFBP-3以及IGF-I和ALS的主要调节因子,因此,三种多肽水平在青春期生*间增加,其后随着年龄的增长逐渐下降。 在儿童中,IGFBP-3已显示与24小时GH分泌相关,因此,IGFBP-3可能对儿童GH缺陷的诊断有帮助。



IGFBP-3 试剂盒检测原理

        GFBP3-ELISA是固相酶扩增敏感性对微孔板进行的免疫测定。标准品和样品与包被的捕获单克隆抗体(MAb 1)和用辣根过氧化物酶(HRP)标记的单克隆抗体(MAb 2)反应。经过孵育形成一个三明治结构:包被的MAb 1 - -人IGFBP3--MAb 2-HRP,洗涤微孔板以除去未结合的酶标记抗体。通过显色测量结合的酶标记抗体反应。加入显色溶液(TMB)并孵育。添加终止液终止反应,然后在适当波长下读取微孔板。被测物含量的显色程度与人IGFBP3浓度成正比。绘制标准曲线,样品中IGFBP3浓度通过标准曲线可直接读取。

IGFBP-3 试剂盒组成成分

 

 成分规格(96T)状态

PLATE
96孔微量滴定板,包被了IGFBP3(单克隆抗体)96孔即用型

AbHRP  CONC
酶标记物浓缩液:HRP标记的抗IGFBP3(单抗),含procin和牛血清白蛋白的柠檬酸缓冲液0.5ml*1瓶用酶标记物缓冲液20倍稀释

CONJ BUF
酶标记物缓冲液:含有牛血清白蛋白和百里酚的tris缓冲液10ml*1瓶即用型

CAL N
标准品-N=1-5,含牛血清和百里酚的磷酸盐缓冲液。
瓶体标签上有具体浓度。
标准品都是预稀释过的,用稀释液做0标准品。
5瓶冻干粉加入1ml蒸馏水

DIL BUF
稀释液:含有牛血清,牛白蛋白和百里酚的磷酸盐缓冲液100ml*1瓶即用型

ConTROL N
质控品N=1或2 ,含有人血清和百里酚,质控品是预稀释过的2瓶冻干粉加入1ml蒸馏水

WASH SOLN
CONC
洗涤液(tris-HCL)10ml*1瓶蒸馏水200倍稀
释(使用电磁搅拌器)

CHROM  TMB
底物液:TMB12ml*1瓶即用型
STOP SOLN终止液:1.0N盐酸12ml*1瓶即用型


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