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福尔马林-EDTA脱钙液操作步骤

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  【信息说明

  产品名称:福尔马林-EDTA脱钙液

  供应商:古朵生化试剂厂家

  规格:500ml

  分类:脱钙液

  储存条件:室温,12个月

  用途:组织脱钙,螯合脱钙剂

  注意事项:主要由EDTA、福尔马林等组成。相对于常规EDTA脱钙液,该试剂脱钙后对组织结构损害小,但脱钙速度更慢。

 

  【自备材料

  1、PBS

  2、蒸馏水

  3、加热装置或微波炉

 

  【操作步骤

  福尔马林-EDTA脱钙液操作步骤主要流程如下:

  1、骨组织脱钙时,取材不易过厚。

  2、组织固定后,用PBS清洗。

  3、组织用蒸馏水洗清洗。

  4、组织转移至福尔马林-EDTA脱钙液中,脱钙10~30天或更长时间。如果想加快脱钙速度,可以置于37℃进行脱钙。如果必要,更换新的EDTA脱钙液继续脱钙,多数组织脱钙2周~3个月即可,每周更换一次,直至终点。亦可采用微波快速脱钙法:微波炉设在200W左右的档位,加热,依据组织厚度和密度重复3~5min,中间间隔3~5min。

  5、用蒸馏水冲洗数次。

  6、常规脱水、包埋。

 

  【注意事项

  1、厚度5mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙10~30天即可。

  2、适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过37~40℃,温度过高容易使骨组织造成松散解体,尤其不可大于60℃。

  3、脱钙应*,防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,以免脱钙过长引起组织损害。

  4、脱钙用具避免使用金属容器,尽量使用玻璃容器。

  5、骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少组织的损伤程度。

  6、每隔一段时间检测一次脱钙程度,脱钙过度会增加组织的损伤程度,影响染色结果。

  7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

  【组成说明

  福尔马林-EDTA脱钙液主要由福尔马林、EDTA等组成,pH值约为7.2~7.4,相对于常规EDTA脱钙液,该试剂脱钙后对组织结构损害小,但脱钙速度更慢。

 

  【简介说明

  在组织切片过程中,一些组织内含有骨质或钙化灶时,含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不同,较难切出完整的切片。对含钙组织固定之后,再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游操作如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。

  用于脱钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。EDTA是一种相对较好的螯合脱钙剂,对组织结构影响小,可以较好的保存组织的某些酶类,经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢,一般脱需要数周至数月。

 

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