红细胞裂解液配制方法由上海古朵生物提供，产品名称：红细胞裂解液，供应商：古朵生化试剂厂家，
规格：100ml/500ml，分类：细胞组分分离，储存条件：4℃,12个月，用途：去除细胞悬液中的红细胞,属于溶解红细胞方法的一种
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产品名称：红细胞裂解液
供应商：古朵生化试剂厂家
规格：100ml/500ml
分类：细胞组分分离
储存条件：4℃,12个月
用途：去除细胞悬液中的红细胞,属于溶解红细胞方法的一种
注意事项：无菌溶液。注意无菌操作,经过滤除菌处理。
红细胞裂解液是一种用于从人或鼠等的血液或组织样品中裂解并去除无细胞核红细胞的溶液。在裂解红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞或其它有细胞核的细胞。本裂解液不适用于有细胞核红细胞的裂解，例如鸟或禽类的红细胞。
本裂解液经过无菌处理，处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的原代培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
1、新鲜组织经过胶原酶或*等消化处理，通过适当方法分散成细胞悬液，离心弃上清。
2、对于0.2mL细胞沉淀加入1mL红细胞裂解液，轻轻吹打混匀，裂解4~5min。
3、加入15~20mL PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，混匀。
4、1000g离心5min，弃红色上清。
5、如果发现红细胞裂解不*，可以重复上述步骤2和步骤3一次。通常极微量的红细胞不会影响后续的一些检测。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀后即可进行计数等后续实验。
说明：对于常规步骤，多一步洗涤过程中的离心，但可以节省洗涤液的用量，并且洗涤效果也更好一些，同时不需要大体积的离心管。快速步骤少了一次离心，但洗涤效果略差一些，同时需要大体积的离心管。
1、试剂配制
原液1号：10 g葡萄糖+0.6 g磷酸二氢钾+3.58 g*(7H2O)+20 ml 5 g/L酚红溶液，加双蒸水定容至1 000 ml。
原液2号：1.86 g氯化钙(2H2O)+4.0 g氯化钾+80 g氯化钠+1.04 g氯化镁+2.0 g*(7H2O)，加双蒸水定容至1 000 ml。
应用液有3种，1#：10 ml原液1号+10 ml原液2号，加双蒸水定容至100 ml。
2#：20 ml原液1号+20 ml原液2号，加双蒸水定容至100 ml。
3#：1 ml原液1号+1 ml原液2号，加双蒸水定容至100 ml。
2、红细胞裂解
取100 μl抗凝全血，加2 ml应用液3#，混匀15～20 s;加2 ml应用液2#，混匀15～20 s;加4 ml应用液1#，混匀15～20 s;300×g离心2 min，弃上清;收集沉淀，加PBS缓冲液，制成白细胞悬液，备用。
(这种红细胞裂解法满足了白细胞流式细胞仪检测分选要求，价格低廉，是一种简便快捷、经济实用的白细胞纯化分选方法。
3、红细胞裂解液(0.01mol/L Tris-HCL pH7.6; 0.01mol/L NaCl; 0.005mol/L MgCl2)
4、红细胞裂解液(139.6 mmol/L NH4Cl, 16.96 mmol/L Tris, 用1 mol/L HCl调 pH至7.2)
5、红细胞裂解液的制备：碳酸氢钾(KHCO3)1.0g;氯化氨(NH4CL)8.3g;EDTA-Na2 0.037g，加双蒸水至1000ml，即工作液。
一、组织细胞样品：
1、新鲜组织经*或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液，离心弃去上清液;
2、从4℃冰箱中取出ELS裂解液，按1:3-5的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml细胞压积加入3-5ml裂解液)，轻轻吹打混匀;
3、800-1000rpm离心5-8分钟，离心弃去上层红色清液;
4、收集沉淀部分，加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次;
5、如裂解不*可重复步骤2和3;
6、重悬细胞，用于后续实验;如提取RNA，是于步骤4开始使用DEPC水配制的溶液中进行。
二、血细胞：
1、新鲜抗凝血，离心弃去上清液;
2、取出4℃冰箱预冷的ELS裂解液，按1:6-10的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml细胞压积加入6-10ml裂解液)，轻轻吹打混匀;
3、800-1000rpm离心5-8分钟，离心弃去上层红色清液;
4、收集沉淀部分，加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次;
5、如裂解不*可重复步骤2和3;
6、重悬细胞，用于后续实验;如提取RNA，是于步骤4开始使用DEPC水配制的溶液进行。
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