大鼠糖化血红蛋白A1c（GHbA1c）ELISA Kit

大鼠糖化血红蛋白A1c（GHbA1c）ELISA Kit上海素尔生物科技有限公司提供，1-2个工作日发货，提供免费代测服务，收到标本起一周内提供原始数据和zui终数据，提供ELISA各种样本收集、处理、保存方法，欢迎您致电咨询库存状态，售后说明等。

大鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA Kit上海素尔生物为您倾情供应，**技术，严格工艺流程，*抗体/抗原，严格QC检测后方可出库，请放心购买！致电：，！ 

中文名称：大鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA Kit

英文名称：Rat Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit

储存温度：-20℃(较长时间不用时)；2-8℃(频繁使用时)

有效期：6个月

产品供应商：上海素尔生物科技有限公司

1-2个工作日发货，提供免费代测服务，收到标本起一周内提供原始数据和zui终数据

ELISA各种样本收集、处理、保存方法

1. 血清标本收集、处理、保存方法：

用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本，全血标本室温放置1－2 h或4℃过夜，然后4℃、3000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。

2. 血浆标本收集、处理、保存方法：

根据样本要求选择EDTA或*或枸缘酸钠作为抗凝剂，用含抗凝剂的*或离心管采集血液标本，室温混合20 min左右，然后4℃、3000 rpm/min离心20 min，小心收集上清即为血浆。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。

3. 尿液标本收集、处理、保存方法：

用干净容器收集尿液，4℃、3000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

4. 唾液标本收集、处理、保存方法：

用干净离心管收集唾液，4℃、3000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

5. 细胞标本收集、处理、保存方法:

（1）细胞培养上清

 取细胞培养上清到干净离心管中，4℃、3000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

1. 细胞裂解液

收集细胞培养液，4℃、3000 rpm/min离心20 min，弃去上清，用预冷的PBS（0.01M，PH 7.4）洗涤三次。加入适量的预冷PBS或细胞裂解液（临用前加入蛋白酶抑制剂）重悬细胞。通过反复冻融，使细胞充分裂解。然后4℃、10000 rpm/min离心20 min，除去细胞碎片，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

6. 植物标本收集、处理、保存方法：

取适量大小组织块（一般0.2－0.5 g），用预冷的PBS缓冲液（0.01M，PH 7.4）漂洗三次，滤纸拭干水分。准确称重，放入匀浆管中，加入4倍体积的匀浆介质（0.05 mol/L Tris-HCl，pH 7.4 PBS缓冲液）于匀浆管中，冰水浴条件下，剪碎组织块，手工匀浆或机器匀浆，制成匀浆液。4℃、10000 rpm/min离心20 min，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

7. 粪便标本收集、处理、保存方法：

采集时用干净的竹签挑取粪便样本到离心管中，向离心管中加入适量PBS缓冲液（0.01M，PH 7.4），搅拌均匀。然后4℃、10000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

8. 组织标本收集、处理、保存方法：

将组织样本用PBS缓冲液（0.01M，PH 7.4）冲洗，洗去组织表面残留的血液或杂质。将组织块称重，记录后剪碎（碎块尽量小）。将组织按一定的比例（通常组织重量：PBS体积=1：9）加入预冷的PBS缓冲液（临用前加入蛋白酶抑制剂）中匀浆，匀浆时置于冰上。吸取匀浆液到离心管中，4℃、10000 rpm/min离心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（较长时间），避免反复冻融。

大鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA Kit

1．E大鼠二氨氧化酶（DAO）ELISA试剂盒LISA试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完， 板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，*使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值)，请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

试剂盒灵敏度、精密度、稳定性

1. 灵敏度：有二层含义，1）为试剂检出被检物质的zui低量的能力；2）为试剂对大量样品中阳性检出的能力。 

2. 特异性：常用交叉反应率表示。其越高说明特异性越好。 

3. 精密度：ELISA试剂一般指其批内CV，其值应小于15%；定量试剂应同时考察线性范围

4. 稳定性：试剂在规定条件下能储存的时间，一般采用破坏性试验即将试剂存放于37℃保存，定期测定其灵敏度，特异性和精密度等指标，直到其质量指标开始下降为止，通常认为37℃每稳定一天相当于4-10℃保存一个半月。 

5. 简便性：指在不影响试剂的前三项指标的前题下，实验和测定步骤越少越好，在定性试验中结果判断简单明了，定量试验结果计算也应简单。

6. 安全性：指试剂对操作者和环境安全无害无传染性。 

7. 经济性：试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本而市场价格比较合理。 

试剂评价：需要有的确证方法确证的样品进行检测，一般实验室不易取得此类样品，每新购进一次试剂评价也很麻烦。可以通过间接的回收实验对试剂进行选择

ELISA试剂盒常见问题及分析

问题分析

若试验效果不好，请及时对显色结果拍照，保留未用板条及未使用试剂，并妥善保存，然后我公司为你解决问题。同时您也可以参考以下资料：

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*个主要的参数是洗涤量。自动洗板机会分配洗涤液。如果你之前遭遇过高背景，那么不要犹豫，将洗涤量调为高，是比包被体积更高。太少的洗涤液会让一部分分析表面洗涤不到，从而明显增加背景。所有反应孔的洗涤量必须相同。ELISA板的制造商通常会在试剂盒的使用手册中列出包被量。行业中通常使用的包被量是200µl。如果你的试剂盒也是这样，那么制造商可能会建议使用300µl洗涤液进行洗涤，以便清洁整个反应孔的壁。一般来说，洗涤量越高，则孵育步骤残留的抗体或抗原量就越少。

第二个影响洗涤效果的主要参数是洗涤循环的量。当然，洗涤次数越多，背景越低。然而，太多次的洗涤会降低信号强度，使其难以测定。通常的做法是在每次抗体或抗原孵育后重复洗涤三次。不过，ELISA板的制造商会对洗涤次数提出建议。一般而言，制造商包被平板需要的洗涤次数比用户包被的平板要少。对于用户包被的ELISA板，必须优化洗涤次数。控制洗涤量和洗涤次数的另一种方法是加入过量的洗涤液。一般来说，96孔板的每个孔能容纳330至460 µl。不过，有些自动化洗板机可设置程序，分配远远超出这个量的洗涤液，比如1 ml。它是如何做到的呢？其实很简单，就是在分液的同时打开吸液功能。换句话说，随着分液器分配更多的液体，抽吸器也将液体吸出。这种技术能增加洗涤量，但不会溢出到其他孔中。

另外，还有一些参数会影响洗涤步骤的效果。这些参数包括吸液高度和吸入位置，这两者都能调整，以降低背景（残留量）和差异。残留液体中包含未结合的抗原或抗体，它们会增加背景信号。残留量越小，残留液体越少，转移到下一步的干扰液体也就越少。吸液高度会明显影响残留量；如果洗涤吸头与反应孔底部的距离稍大，那就会让残留量急剧增加。反之，如果洗涤吸头压着反应孔底部，那么也会使吸液效率降低，残留量增加。目前的洗板机一般使用两种类型的洗头：刚性和浮动。浮动洗头中的吸头可在洗涤过程中自由上下移动，而刚性洗头则固定在适当的位置。使用刚性洗头的洗涤操作在优化起来更为复杂，因为你需要非常仔细地调整吸液高度。如果你们实验室使用几种不同的板，那可能会很耗时。在使用浮动洗头时，吸头会降到反应孔的底部。调整高度就不是很重要，因此洗头会下降到底部。抽吸的位置也对残留量有着重要影响；如果每个孔只使用一个抽吸点（这很常见，因为更快），那么抽吸的位置需要优化。*的位置取决于洗头的性状，但它几乎不在反应孔的中间，即使这是所有洗头zui常见的默认位置。一般来说，*位置在孔中间与孔壁之间的某处。反应孔的形状也会影响残留量。C形底（平底圆角）的微孔板一般会比那些平底尖角的微孔板残留量更低。如果没有自动洗板机，采用手工洗涤，那么也需要注意几点。使用8道或12道微量移液器，采用倒吸的方法进行洗涤；不同厂家的洗液不宜相互混用。洗板时需保证微孔板平放，将洗涤液注满各孔，但尽量避免漏液溢液，以每孔300 µl为宜；板洗次数一般为3次，要保证洗板的浸泡时间，每次浸泡时间一般为30-60 秒；尽量减少洗液残留量，*每次洗板后进行拍板，并及时更换吸水纸，避免吸水纸的碎屑粘到反应孔内。

大鼠糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)ELISA Kit看起来很简单，但是在实际操作过程中，也不能掉以轻心，还是应该仔细检查洗涤步骤，才能获得准确的结果。