Human TNF-α ELISA

Human TNF-α ELISA用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人 TNF-α 单克隆抗体预包被在高 亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，经过孵育，样本 中存在的 TNF-α 与固相抗体和检测抗体结合。

Human TNF-α ELISA试剂准备:

检测前请将所有的试剂、样本恢复至室温。 如果浓缩的试剂出现结晶，37℃温浴，直至结晶全部溶解。 1×洗液 吸取 20×浓缩洗液 50 ml 至 1 L 的量筒，加蒸馏水或去离子水至 1000 ml，轻轻混匀，避免泡 沫。 转移至干净瓶内。2 - 25℃贮存，1×洗液可稳定 30 天。 1×检测缓冲液 吸取 10×浓缩检测缓冲液 5 ml 至 100 ml 量筒，加蒸馏水或去离子水至 50 ml，轻轻混匀，避 免泡沫。 2 - 8℃贮存，1×检测缓冲液可稳定保存 30 天。 检测抗体 稀释前充分混匀。根据标准品和待测样本的数量，用 1×检测缓冲液按 1：100 稀释浓缩的检 测抗体。 注意：请在 30 分钟内使用稀释后的检测抗体。 辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 稀释前充分混匀。 根据标准品和待测样本的数量，用 1×检测缓冲液按 1：100 稀释浓缩的辣根过氧化物酶标记的 链霉亲和素。注意事项：请在 30 分钟内使用稀释后的辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素。

Human TNF-α ELISA检测原理：本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人 TNF-α 单克隆抗体预包被在高 亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，经过孵育，样本 中存在的 TNF-α 与固相抗体和检测抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶标 记的链霉亲和素(streptavidin-HRP)。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与 样本中 TNF-α 的浓度成正比。加入终止液终止反应，在 450 nm 波长(参考波长 570 - 630 nm)测定 吸光度值。

Human TNF-α ELISA介绍：TNF-α 对刺激物 (感染因子或组织受损) 产生应答后，在全身循环，激活中性粒细胞，改变血管内皮细胞的特性， 调控其它组织的代谢活性，以及通过诱导局部凝血作用展现肿瘤杀伤活性。 TNF-α 在关节组织和其它组织发生炎症的发病机制具有重要作用。 zui近，越来越多的信息表明 TNF-α 也参与了 AIDS 的发病机制。TNF-α 的测定对于移植研究也非常有用。

Human TNF-α ELISA灵敏度: 人 TNF-α 的zui低可检测浓度为 0.42 pg/ml。 10 个零标准品浓度 OD 的平均值加上两倍 SD，计算zui低可检测浓度

Human TNF-α ELISA标本要求：血清，血浆，细胞培养上清