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第三期
溶解的空气(氧)对检测的影响
形成气泡产生的影响较容易被理解，它往往使压力波动，造成基线噪声。然而，有时溶于溶剂的空气并不形成气泡，但其造成的影响依然是严重的，且不易被发现。
1.大量溶解的氧气对检测的影响
溶解于溶剂的气体中，氧气对检测的影响大，而且是多方面的。即使在当时的温度、压力下，溶解于溶剂的量并不饱和，不足以形成气泡，其影响还是相当严重的。
(I)荧光检测：当使用荧光检测器来测定萘、芘等多核芳香烃或维生素E等生育酚时，溶解于流动相中的氧，由于荧光猝灭而影响化合物荧光强度，干扰测定。此时，尽管基线稍有降低，峰高的降低则更为明显。例如，当大量氧气溶于流动相对；测得萘的荧光强度(峰面积)只有完全脱气以后萘的峰面积的25%。
(II)电化学测定：特别是在还原电位下测定时，由于氧的浓度高，产生还原电流使信噪比变差。
2.大量或可变的溶解氧对紫外检测的影响
在紫外区，氧本身就有吸收，使测得结果和基线都偏高，例如在210nm饱和有空气的甲醇(氧的分压 0.2大气压)在过氦脱气以后，基线可降低0.32吸收单位(图一)。
图一：210nm测定时脱气与否对基线的影响
由引可见，经过脱气可大大降低紫外区的背景。另一方面，氧气的存在不仅使基线变高，而且当氧气的浓度随着压力、温度等诸因素变化而变化时，将使基线波动十分严重。由上例可知，如果在满标尺 0.01吸收单位测定时，氧的浓度变化1%，将引起基线相当于30%满标尺的变化。此外，当使用含氧的甲醇等作梯度洗脱时，随着流动相甲醇的含量增多而升高的基线，有可能影响进一步的数据处理(见图二)
图二：水-甲醇梯度洗脱时，脱气与否对210nm处测定基线的影响，甲醇在30分钟内由20-60%变化，然后维持5分钟
溶解氧的影响在短波区较为明显，但也与溶剂种类有关，例如溶解氧对 四 氢funan的影响一直延伸至254mm处，在254 mm处，溶解氧的影响由 四 氢funan ，甲醇、乙腈、水逐渐降低。就乙腈而言，即使在较短长区影响也不明显。因此，同样的氧气浓度、对不同的溶剂其影响也不同，可见其吸收的增加并非完全由于自身的吸收，也许还与氧与溶剂杂质之间的某些反应有一定的关系。
进行紫外波外区高灵敏测定时，一般采用乙腈较好，如果为了提高分离效率，则一定要控制好溶解氧的量，换言之，必须采用适当的脱气手段。
3.溶解空气量的变化引起示差检测时的基线漂移
折射率不仅与液体中固体或液体溶质的浓度有关，也与气体溶质的浓度有关。因此，由于温度变化而引起气体溶解量的变化，将使折射率基线漂移波动。例如以 四 氢funan为溶剂，在满标尺为8×10-6折射率单位的情况下测定时，溶剂中空气的溶解量改变1%，则导致10%以上的基线变化。要抑制此种干扰，需使流动相处于恒温，或用氦置换溶解的其它气体，相对而言，氦的溶解度随温度的变化较小。
图三：对示差检测器基线的影响
综上所述，即使未形成气泡，溶解的空气对测定还是有影响的。
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