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分光光度计使用条件限制分析

点击次数:365 发布时间:2014-11-6

    导读:的工作原理是是物质对光的选择吸收和琅伯-比尔定律。而琅伯-比尔定律的限制性条件有如下三点:
  a.通过溶液的光必须是平行的;
  b.通过溶液的光必须是单色光;
  c.待测溶液必须是纯净的、均匀的且浓度不宜过高,这是琅伯-比尔定律首要的三个前提条件。
当然在实际的的制造和使用过程中这三个条件是不可能达到的,原因如下: 
  a.因为光是直线传播的,在分光光度计制造过程中,灯源发出的光是发散的,经过聚焦镜进行聚焦等直到经过溶液的整体过程中,光是不可能平行的。
  b.灯源发出的光是复合光,经过狭缝,再经过光栅分光等步骤,因为受到狭缝和光栅本身的限制,光栅分光不可能达到纯单色光。还有光度计的整体设计问题,光度计不可能没有其它的杂光存在。
  c.用户的溶液也不可能是纯净的,也会含有一些杂质,这些对光度的吸收都会存在影响。除以上三个方面的影响外,在实际的光度计应用过程中还会存在其他因素的影响,例如:
1、经过比色皿的光是否垂直;
2、比色皿宽度是否为10mm的标准值;
3、测试波长是否准确;
4、程序设计是否存在漏洞等等,都会直接影响到利用琅伯-比尔定律计算出的结果。
所以在日常的测试过程中,得出的结果和琅伯-比尔定律有些偏差是很正常的,只是我们关注偏差多少的问题。

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