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技术文章

SB色谱柱的柱效能是评价色谱性能的一项重要指标

点击次数:33 发布时间:2023-2-17

  SB色谱柱是气相色谱的核心部件,用以分离各种复杂的混合物。通过学习了解色谱柱的分离基本理论,了解色谱柱分离的基本原理,在实际工作中根据测试项目选择zui合适的色谱柱,得到所需的分离效果。
 
  SB色谱柱的维护:
 
  1. SB色谱柱的平衡
 
  反相色谱柱由工厂测试后是保存在乙腈/水中的。新柱应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱。请一定确保您分析样品所使用的流动相和乙腈/水互溶。每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱,您就会在处理问题方面获得zui大的"补偿",而且您的色谱柱的寿命也会变得更长!操作步骤:
 
  a. 平衡开始时将流速缓慢地提高,用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂流速如果较低,则需要较长的时间来平衡)
 
  b. 如果使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水"过渡"即每天分析开始前必须先用纯水冲洗30分钟以上再用缓冲盐流动相平衡; 分析结束后必须先用纯水冲洗30分钟以上除去缓冲盐之后再用甲醇冲洗30分钟保护柱子。
 
  2. SB色谱柱的再生
 
  长期使用的色谱柱,往往柱效会下降(柱子的理论塔板数减低)。可以对色谱柱进行再生,在有条件的实验室应使用一个廉价的泵进行柱子的再生。
 
  建议用来冲洗柱子的溶剂体积
 
  SB色谱柱尺寸柱体积所用溶剂的体积
 
  125-4mm 1.6ml 30ml
 
  250-4 mm 3.2ml 60ml
 
  250-10mm 20ml 400ml
 
  选择再生方法:
 
  极性固定相(如Si,NH2* ,DIOL基色谱填料)的再生:
 
  正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水
 
  非极性固定相(如反相色谱填料RP-18,RP-8,CN等)的再生:水→乙腈→氯仿(或异丙醇)→乙腈→水
 
  SB色谱柱的柱效能是评价色谱性能的一项重要指标,混合物能否在色谱柱中得到分离,除取决于选择合适的固定相外,还与色谱操作条件及色谱柱的装填状况等因素有关。在一定的色谱操作条件下,SB色谱柱的柱效可用理论塔板数或理论塔板高度来衡量。一般说来塔板数愈多,或塔板高度愈小,SB色谱柱的分离效能愈好。

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