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技术文章

一支“好“SB色谱柱的重要意义

点击次数:67 发布时间:2023-2-17

  SB色谱柱是专门为扩散体积很低的 UPLC 系统而设计的,ACQUITY UPLC全新的设计很大地提高了分离度,样品通量和检测灵敏度。BSB色谱柱用于在低pH流动相条件下分离碱性化合物和非碱性化合物组成的混合物,同现代高C18覆盖率和端基封尾的C18柱相比,这款SB色谱柱能够提供不同的分离选择性。昭和电工科学仪器(上海)有限公司专门研究色谱填料的科学家们在HSS硅胶基体上采用三键键合技术,键合了中等配体密度(约1.6 μmol/m2)的C18配体,而且没有对游离硅羟基进行端基封尾。一般来说,同现代的高C18覆盖率端基封尾的C18SB色谱柱相比,较高活性的硅羟基将增强碱性化合物的保留,而中等C18配体密度能够对非碱性化合物产生较弱(或相当)的保留。从色谱理论分析,这种的键合和端基封尾组合将成为复杂UPLC分离方法开发工作中一个实用且方便的工具。
 
  SB色谱柱是HPLC分离过程的核心.一支稳定,的色谱柱对建立普适性强,重现性好的方法是*的.不同供应商的SB色谱柱,甚至来源相同,认为一样的色谱柱之间,可能也会存在很大差异,尤其是不同的色谱柱在塔板数,谱峰的对称性,保留值,峰间距以及使用寿命方面会有所不同,而这些不同对建立理想的HPLC方法会产生很大影响.本章中,我们将提供一些有关SB色谱柱担体,固定相及柱填料的信息供读者参考;讨论SB色谱柱应用中的问题,以及适宜的解决方案,以确保方法普适性强,重现性好,同时也讨论了在常规HPLC分析中,为获得结果,一支"好"SB色谱柱的重要意义.
 
  选择HPLC柱时,大多数使用者都认为柱间的重现性是方法建立中极为重要的因素.色谱工作者不愿在校准了一具体系统后,又不得不为一新SB色谱柱再重新建立HPLC方法.一些生产厂能在一定程度上保证柱性能指标的重现性,如色谱柱塔板数(N),特定样品与条件下的选择性,反压(压力降),特定测试溶质的保留值(k).因此,对许多使用者来说,生产产品的厂家的信誉很重要.价格对一些用户是重要的因素,但上述讨论的其它因素在建立一个普适性强,令人满意的方法时往往更加重要.SB色谱柱价格在建立和应用普适性强,可靠的HPLC方法的整个费用中,仅占一小部分色谱柱的键合化学包括T3和C18两种,其中T3是设计用于保留和分离极性有机物的色谱柱,能够耐受99%的纯水相流动相而不会出现“相塌陷”的问题,其性质同SB色谱柱相近 ;推出的色谱柱是超高柱效的C18键合相,为碱性化合物提供优异的峰形;同ACQUITY UPLC BEH C18相比,HSS C18提供更强的保留,而且在低pH流动相条件下具有的柱寿命。
 
  大多数用于SB色谱柱是用一节内壁经高度抛光处理的直不锈钢管,用收缩接头将其与HPLC仪器连接.不锈钢可用于所有有机溶剂与大多数水性缓冲液.然而,含氯的流动相会缓慢地"卤素腐蚀"不锈钢材质(尤其在低p H时),所以使用该流动相时应倍加小心.综合考虑的话,大多数HPLC用不锈钢SB色谱柱.也有用玻璃,玻璃衬里不锈钢与塑料制作的商品柱,用于可能与不锈钢发生有害作用的特殊样品.然而,资料中能证明不锈钢柱发生这类问题的很少.这些与不锈钢成分(铁,铬,镍)牢固络合的样品有可能产生这类问题.SB色谱柱内壁的表面积很小,所以发生不良反应的机会不大.
 

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