酶-重量法1.原理：样品分别用α-*、蛋白酶、葡萄糖苷酶进行酶解消化以去除蛋白质和可消化的淀粉。总膳食纤维（TDF）是先酶解，然后用乙醇沉淀，再将沉淀物过滤，将TDF残渣用乙醇和丙酮冲洗，干燥称重。不溶性和可溶性膳食纤维（IDF和SDF）是酶解后将IDF过滤，过滤后的残渣用热水冲洗，经干燥后称重。SDF是将上述滤出液用4倍量的95%乙醇沉淀，然后再过滤，干燥，称重。 TDF、IDF和SDF量通过蛋白质、灰分含量进行校正。2.适用范围AOAC991.43 本方法适用于各类植物性食物和保健食品。3.仪器3.1烧杯：400或600ml高脚型。3.2 过滤用坩埚：玻料滤板，美国试验和材料学会（ASTM）40-60μm，Pyrex 60ml（Corning No.36060 buchner，或同等的）。如下处理：（1） 在灰化炉525℃灰化过夜。炉温降至130℃以下取出坩埚。（2） 用真空装置移出硅藻土和灰质。（3） 室温下用2%清洗溶液浸泡1小时。（4） 用水和去离子水冲洗坩埚；然后用15ml丙酮冲洗然后风干。（5） 在干燥的坩埚中加0.5g硅藻土，在130℃烘干恒重。（6） 在干燥器中冷却1小时，记录坩埚加硅藻土重量，至0.1mg。3.3 真空装置：（1） 真空泵或抽气机作为控制装置。（2） 1L的厚壁抽滤瓶。（3） 与抽滤瓶相配套的橡皮圈。3.4振荡水浴箱：（1） 自动控温使温度能保持在98±2℃。（2） 恒温控制在60℃。3.5 天平：分析级，至±0.1mg。3.6马福炉：温度控制在525±5℃。3.7干燥箱：温度控制在105和130±3℃。3.8干燥器：用二氧化硅或同等的干燥剂。干燥剂两周一次在130℃烘干过夜。3.9 PH计：注意温控，用pH4.0、7.0和10.0缓冲液标化。3.10 移液管及套头：容量100μl和5ml。3.11 分配器或量筒：（1） 15±0.5ml，供分配78%的乙醇，95%的乙醇以及丙酮。（2） 40±0.5ml，供分配缓冲液。3.12. 磁力搅拌器和搅拌棒。4. 试剂全过程使用去离子水，试剂不加说明均为分析纯试剂4.1 乙醇溶液：（1） 85%：加895ml95%乙醇在1L量筒中，用水稀释至刻度。（2） 78%：加821ml95%乙醇在1L量筒中，用水稀释至刻度。4.2 丙酮：4.3 供分析用酶：在0-5℃下储存。（1） 热稳定α-*溶液：Cat. No. A3306，Sigma Chemical Co.，St. Louis，MO63178，或 Termamyl 300L，Cat. No. 361-6282，Novo-Nordisk，Bagsvaerd，Denmark，或等效的酶。（2） 蛋白酶：Cat. No. P3910，Sigma Chemical Co.，或等效的。当天用MES/TRIS缓冲液中现配50mg/ml酶溶液。（3） 淀粉葡糖苷酶溶液：Cat. No. AMG A9913，Sigma Chemical Co.，或等效的。4.4 硅藻土：酸洗（Celite 545 AW，No.C8656，Sigma Chemical Co.，或等效的）。4.5 洗涤液：两者挑一。（1） 铬酸：120g重各酸钠Na2Cr2O7·2H2O，1000ml蒸馏水和1600ml浓硫酸。（2） 实验室用液体清洁剂，预备急需清洗的（Micro，International Products Corp.，Trenton，NJ08016，或等效的）。用水配制2%溶液。4.6 MES-TRIS缓冲液：0.05mol/L，温度在24℃时pH值为8.2。（1） MES：2-（N-吗啉代）磺酸基乙烷（No.M-8250，Sigma Chemical Co.或等效的）。（2） TRIS：三羟（羟甲基）氨基甲烷（No.T-1503，Sigma Chemical Co.或等效的）。在1.7L的蒸馏水中溶解19.52gMES和12.2gTRIS，用6mol/L NaOH调pH到8.2，用水定容至2L。（注意：24℃时的pH为8.2，但是，如果缓冲液温度在20℃，pH就为8.3，如果温度在28℃，pH为8.1。为了使温度在20-28℃之间，需根据温度调整pH值。）4.7 盐酸溶液：0.561mol//L，加93.5ml6mol/L盐酸到700ml水中，用水定容至1L。