显微镜往往代表资金显著投资，是需要定期维护和清洁，以保证成功的显微镜和完美的图像精密的光学仪器。 如果忽略了，接触到灰尘，绒毛，花粉，灰尘，以及未能去除浸油及时会严重损坏的光学性能。 多年来，一直推荐各种洗涤程序，但很多用户仍不能确定其中哪些会产生的结果。 的清洗方法的选择依赖于光学表面的性质和要除去物质的类型。
该保持未使用的时间可以从空气中，这会导致图像质量的恶化积聚的灰尘和碎片的长周期即使仪器可以是实际的新的显微镜。 即使在仔细对覆盖在闲置期间的保护，但是，是经常使用显微镜如有建立污染物。 其中的一些不可避免地从环境和其他由显微镜本身引入，特别是在区域所在的手，睫毛，甚至从呼吸接触仪器随时间水分。 关键领域包括：
物镜的前透镜的外表面
相机传感器的表面，它的保护玻璃盖
盖玻片的两面
显微镜载玻片的表面
照相机适配器光学器件的表面
聚光镜
上部透镜的表面
目镜的外表面和内表面以及该手提包的上表面
任何保护用玻璃的外表面，通过该光出口覆盖开口
在光路中其他玻璃表面，如卤素灯，高压弧光放电灯，荧光过滤器和分束器，集电极透镜或对比度和热过滤器
一些光学表面的污垢比其他人更敏感。 物镜的前透镜是特别显著，因为当达到或接近共轭场光学元件(图像)面变脏，破损，或有缺陷的，伪影可能出现在重叠试样的图像上锐聚焦(见图2 )。 讽刺的是，光学元件，如聚光镜和收集和中继透镜的质量越高，越这些瑕疵干扰，并有助于光噪声。 之前每个关键用途，检查污垢物镜的前透镜 。
为任何干物镜，较小的自由工作距离与凹前透镜的小的表面积，弄脏与包埋介质中，浸没液体或粉尘的前透镜的更大的危险。 浸没物镜的镜头前应清洗都使用后应用新鲜浸液前去除残留物。 不同浸没介质，以及不同批次的相同培养基的混合可导致图像模糊。 尽管浸油的利用率大化显微镜的光学性能是至关重要，每次使用构成严重的污染物，它必须与在仪器维护处理后其不正当使用或未能立即除去油，并因此将在进一步详细讨论在后面的部分。
即配有数码相机的显微镜可能发展引起的污染的累积捕获的图像质量或展览图像伪像的劣化或上了在摄像机适配器或可以结合以密封相机的光学玻璃窗口上有时利用过滤元件壳体和保护电荷耦合器件（CCD）或互补金属氧化物半导体（CMOS）图像传感器。 在实践中，如果在数字图像中观察到暗斑或类似的聚焦构件，并它们不是在试样平面上，其可能的原因是在图像传感器上或与其相关的过滤器表面的微粒污染。 摄像机总是需要以大的小心处理，并根据制造商的建议从污垢的保护。
灰尘和碎屑
熟悉与特定技术和程序获得的的可能的结果允许用户识别脏光学的后果。 比较预期图像并相对于锐度，对比度实际获得的图像，并且不存在污染依赖视觉伪影的能力允许用户当在显微镜脏污或不立即识别。 如果图像锐度或对比度不是的，则存在的可能性高，该显微镜光学器件是不干净 。 为了确定污垢的位置，步骤如下：
小心旋转物镜和摄像机其线程内，少量。
通过移动样品而初聚焦在上，然后将下表面检查滑动和盖玻片。
检查聚光镜，同时向上和向下，如果适用移动它，通过轻微的旋转镜头前。
当疑似光学部件移动受影响的光学表面被识别和污垢遵循这一运动。单例外是摄像机。 当摄像机移动污垢位于摄像机(通常在光学窗口保护图像传感器)内不会移动。 对于较大的灰尘颗粒和光学表面上的划痕宏观检查可以使用一个放大镜(具有3×的放大倍数6倍)，或通过相反的孔观察(在效果的目镜来进行，通过目镜的相对端对等)。 一个弄脏物镜前透镜容易被通过物镜的后孔检查的光线均匀表面识别。 内部透镜机构产生存在于前透镜的外表面的小污染物的放大图像。 后的检查应该总是涉及图像质量的改善进行评估。
这是至关重要的粉尘(例如，从载玻片玻璃粉尘，从显微镜的皮肤薄片，从衣物纤维，花粉从春季和夏季开花)以及其它污垢(液体或干涸的嵌入或浸没介质来区分(参见图3)，文化解决方案，从清洁不当企图，指纹和油污)残留。 灰尘颗粒可以松散地休息，或者可以是对光学表面或多或少卡住。 其它污垢或者是水溶性的或者可以仅使用有机溶剂*除去。 然而， 模糊的图像可能不总是由于污垢 。 使用物镜在与错误的厚度的盖玻片组合，大的数值孔径可导致图像模糊(球面像差)。 高数值孔径的干物镜通常具有校正项圈，其允许为球面像差补偿。 许多高度纠正浸泡物镜也需要精心挑选盖玻片厚度为170微米，如果需要的图像。
浸没物镜应该仅结合使用与合适的，无气泡的浸油。 尽管浸油的粘度任何立即迁移小化到不期望的位置，如果不及时清除并且被允许累积，重力和毛细管力的作用将终导致油移动到台下机构和显微镜支架部分，甚至到物镜。 这种积累可能不容易看见，并且可以被忽视，直到机械或光学问题变得严重程度足以用显微镜修理设施要求的服务。 偶尔推荐使用的芳香族胺，苯甲醚，如清晰度和对比度的损失的浸没介质的结果。 苯甲醚可以攻击的前透镜的水泥，尤其是年长的物镜，并且应该避免。
光学表面
凹形或凸形表面(例如，干的物镜和电容器或一些目镜的眼透镜的前透镜)应当从平面平行或平坦面等的大部分浸入物镜的前透镜，以及聚光镜区分器，过滤器，以及保护玻璃覆盖相机传感器或光通过其离开所述开口。凹面或凸面正在使用的棉花或如在下一节中描述的新的聚酯拭子清洁。 交通方便的平坦表面可以用柔软的一次性湿巾纤维素可以类似地清洗。 显微镜光学可以由任一光学玻璃，石英或聚合物。 几乎所有的部件的上表面将与防反射层被涂覆到杂散光小化。 一些这些涂层可以是wipeable与否，由于其柔软性。 通常，抗反射涂层组成的氟化镁和仅应与由氨和无酸剂进行清洁。 到有害溶剂几种选择已经发现是有效的在显微镜的清洁，以及各种清洁剂，以及清洁材料，是由不同的显微镜和制造商推荐的。 一些光学元件是由黑色防反射表面，其是有机溶剂敏感包围。 目镜的塑料和橡胶部件将同样由有机溶剂，包括丙酮，二氯甲烷，和氯仿被攻击。
一与许多证明有效用于清洁显微镜光学溶剂的危险是，它们必须溶解在透镜组件使用的水泥的电位(如做允许留在光学浸没油本身如果)。 在年龄较大的显微镜，镜片用醇可溶水泥如加拿大香脂胶结。 苯被认为是一种非常有效的镜头的时候清洗溶剂，但总是需要十分谨慎，限制与透镜接触时间不超过一两秒钟，多由于用于镜头香脂的苯和其他一些水泥溶解度高安装(以及有关标本载玻片安装盖玻片)。 已知的是苯是通过皮肤容易被吸收，(在此以及吸入蒸汽可引起肝损害)和见的透镜水泥通常由合成聚丙烯酸树脂，这是不醇溶的。 二甲苯已被广泛用于清洁光学表面多年，虽然它是非常易燃的，有毒的，致癌性，并可能导致皮肤接触灵敏度，二甲苯仍比苯较少侵略性。 即使它们被推荐作为透镜清洁溶剂两种溶剂是有害的许多显微镜的机械和光学部件。
专有溶剂Histolene和Histoclear日益普及作为替代在显微镜实验室二甲苯，并已发现可有效用于清洁其它仪器为好。 图4所示是几个商业产品设计用于清洗显微镜。 纯净蒸馏水为任何污染的可溶于水的清洗液，但如果这是不够的，商业摄影镜头清洁液是非常有效和有节制地使用时是安全的精密光学技术。 有时家用玻璃清洗剂，其中含有稀氨水，推荐但它们不应被常规使用。 显微镜的内部工作，包括光学表面，荧光滤波器集，相机和摄像机适配器组件不应该由用户清洗，而是通过从原来的生产经验丰富的客户服务代表。 用户应该只清洁物镜前透镜，聚光前透镜，目镜，玻璃颜色和转换器，和保护用玻璃的覆盖，通过该光出口任何开口的外表面的外表面。
清洁剂和方法
在清洁的显微镜光学表面的物镜是*除去灰尘和污物不离开清洗剂的任何残留物或损伤表面。 以下设备是必需的：
长而细的木棍，竹的(来自中国餐馆的供应商索取)或类似的，不要太柔性材料
高纯度棉
吸水聚酯棉签清洁光学元件
化妆品软组织纤维素专为光学表面设计(Kimwipes适合镜头清洁，但典型的面部组织中含有硬颗粒有害于光学表面)
除尘风机或洗耳球(实验室的供应商，药店)
蒸馏水
在10毫升蒸馏水洗涤液的5〜10滴的新鲜制备的溶液
溶剂的去除油腻或油性污垢，如光学清洗液L时，纯石油醚(85%石油醚，15%异丙醇的配方)(分析纯，沸点小于44摄氏度)，或只用于清洁盖玻片，纯丙酮
为平坦面，如从盖玻片除去浸没介质或从浸没物镜前透镜移除浸没介质的易于清洗，软组织浸泡在稀释洗碗液是合适的。 平滑镜头纸(所谓的约瑟夫纸)，这往往是在研究实验室容易获得，是不进行清洗，但仅用于无尘存储和光学元件的保护。 对于清洁的目的，这个镜头纸过于苛刻; 它也没有有效或足够快地吸收的污垢。 高纯度棉清洗组织代表的例外。 对于所有其他光学表面清洁，无论是新鲜的棉签，镜头纸或棉签聚酯使用。
棉签的制备
棉签是未处理适合显微镜清洗，并且是市售的，或者可以根据下面的方向进行组装。 原棉，通过在辊药店出售，通常含有合成纤维的一些比例，并且是不适合于精细表面的是100%的棉花。
洗手(粉状，乳胶手套不适合)。
浸棒到清洗液(水或有机溶剂)。 棉纤维附着更好的棒作为结果。
民建联棒到100%的棉花WAD和放松一些纤维。 不压缩棉否则纤维将不易分开。
转动杆，使得在偶数，椭圆形棉棒形式。
为了防止污垢棉尖，棒应存储在一个塑料夹层袋。 它不应该是汗水和油脂(从手指)将显著影响其清洁能力来处理。
取出棉尖每擦拭后，用新鲜的棉签取代它。
棒可用于的很长一段时间。 使用单独的棒对水基溶液和有机溶剂。
如果使用了高纯度的棉透镜清洁组织是优选的，从而产生一个尖锐的点周围的棒折叠片。 问题的关键不应该被处理。 使用组织只有一次，然后替换它 。 聚酯拭子可以使用，直到他们不再干净的好。
清洗程序
放置物镜，目镜，以及照相机上的无尘表面(新鲜的铝箔，例如)。 任何清洁尝试之前，该光学表面应与放大反射光下检查，以确定组件的状况。 特别应注意的任何颗粒材料的存在下，它必须被认为是磨料，以及任何其他的清洗完成之前除去。 2倍的放大镜3倍(如放大镜)适用于检查大光学如目镜和聚光镜，而物镜的小镜片大约需要5到10倍的放大倍率进行适当的检查。 至关重要的是，颗粒物质被从镜片表面清洁所述步骤中除去，因为任何粒子可以是磨料和导致的划痕，如果它是在表面刷与即使是温和的晶状体组织。 所有其它光学部件要被清洁应该尽可能访问。
吹所有松动的尘埃粒子逃脱压缩气体除尘器，风机，或干净的刷子驼千万不要吹灰尘镜头，拥有强大的气息表面 ，并确保在整个(不垂直)镜片表面轻轻吹气。 空气喷粉的的方法是使用一个橡胶球或气球，如打算用作耳和灌肠注射器婴儿模型。 需要小心避免接触注射器镜片表面的一角。 的建议是避免任何使用压缩空气罐镜片清洗。这是很难与这些控制空气冲击表面上的压力被清理，而且总是有非常任冷空气的风险或冷冻液被驱逐到镜片表面，造成不可挽回的损失。
除去用蒸馏水所有水溶性污垢。 如果此步骤不成功，重复使用稀释洗涤液的溶液。 清洁与干棉签任何剩余的残余物，但以开放口的表面上呼吸至产生湿气的膜。 这样算下来，要小心不要喷唾液飞沫。准备镜头纸这种清洗方式的一个有效的方法是一块组织的各个角落折叠在一起，使组织突出来的不变中心。 边角可以一起稍扭曲，形成处理组织干。 当组织被该阀杆保持，并且与膨化出组织中心抹进行的，可应用到目的通过的组织的弹性限制力。 圆形擦拭运动可以以这种方式适用，但在镜片表面上很少直接力。
要去除油性污垢，用稀释的洗涤液溶液初。 如果这个动作不会产生令人满意的结果，重复使用溶剂(光学清洗液L或石油醚)清洗。 油污必须始终使用溶剂来除去。 沾棉或聚酯拭子插入清洗液并甩掉多余的液体。 的液体在棉签过量会流过透镜的边缘和攻击透镜水泥。 这可能因此导致消除接合组件之间的水泥。 溶剂应消除尽可能多的污垢越好。 为了增加挥发性有机溶剂的保留时间在棉花芽，一些用户冷却溶剂(摄氏-10度至-20摄氏度)。 冷溶剂中有缺点。 由于它们的低温度，冷凝可形成在透镜表面上，并留下残余物。 以提高溶剂的保留时间的更合适的方法是加入异丙醇。
清洗是使用从中心到边缘的螺旋运动来实现 (参见图5，详细了解清洁过程)。 从未擦拭用锯齿运动，因为这将只传播的污垢。 从手指直接压力不应该以如果任何颗粒存在于所述组织，以尽量减少划伤透镜的可能性被施加到玻璃透镜表面 。 对于较大的光学表面，如管镜片，螺旋运动初开始于边缘移动到中间之前，并且只然后由中心到边缘的清洁运动。 在大多数情况下，推荐了几种湿巾，每次使用新鲜的小费。
不是所有的解决方案可用于清洁的显微镜的光学器件。 一些清洁很有效的，但是任一毒性(氯仿和丙酮)或对环境不友好()，而其他人将离开表面残基(二甲苯，甲苯和二)。 残余物的形式很容易地与使用二甲苯和无水乙醇，以及当污垢包含水溶性组分如。 当油脂必须从盖玻片取出建议丙酮。 丙酮攻击大多数类型的塑料，以及橡胶，并因此，它的使用来清洁目镜可能会产生问题。 此外，经常使用时，丙酮可能攻击胶合等光学元件的物镜，照相机适配器透镜或目镜。 丙酮也能溶解专门的有机涂层。
现代显微镜的油漆外表面有粉末涂层，非常耐用。 他们能很好用很轻蘸湿超细纤维布进行清洁。 松散灰尘等污物可以使用专门用于这一目的的软毛的刷子除去。 以下的机械部件的完整的清洗和在仪器的附近小心擦拭的任何液体泄漏，一个小的真空吸尘器软管和软刷子附件可以被用来去除它周围的立场和表区域中的任何疏松材料。 应小心，以避免与真空刷接触任何光学表面。
浸油的正确使用和清洁
秉承在使用浸油的下面的程序将显著简化从显微镜组件除油它造成损害前的任务。 要认识到浸入油不是惰性的相对于光学或机械显微镜部件，如果留在与仪器接触，油会渗透到齿轮和滑动机构并进入透镜元件及其安装结构与间缝隙是很重要可能造成不可逆的损害。
显微镜的光学系统，当使用浸没物镜数值孔径的充分利用，需要在其中浸油的单滴施加到台下聚光镜的顶部透镜表面上和样品载玻片的顶部另一单滴双注油技术可容纳只有一个单一的在每个标本光接口滴油不产生污染，这可能是不可能没有*拆卸或仪器的厂家维修清洁。 然后聚光镜升高只是为了使油滴接触滑动的下表面，并且物镜前透镜被带到与上滑动的顶部油滴接触的点。 应当强调的是，浸油的方法是只用装有一种浸入式顶部透镜的聚光镜中使用，并用浸泡物镜。 任何通过浸入油中的应用，以提高干物镜的性能的尝试可能会导致它的破坏，因为这样的物镜是，在空气中使用的光学优化，并且不针对流体的侵入镜筒密封。
每个标本已审查之后，浸油应*除去，即使附加载玻片要被观察到。 浸油仅使用镜头纸清洁，不使用任何溶剂。 即特殊设计用于高品质的光学镜头清洁纸必须采用，并且应该被存储在有盖容器，以防止空气中的悬浮粒子污染。 镜头纸(用两只手下光张力保持)的折叠片跨接在物镜的前透镜吸引到吸收油，并与组织的新的区域重复。 这种温和的透镜表面的擦拭，应根据需要，直到没有油条纹看到的组织作为许多组织被重复，并且每个组织应立即丢弃，以避免无意中重新使用的物镜污染组织。 使用大量的新鲜透镜的组织是这个程序的成功至关重要 。 自然倾向，以尽量减少废物误导，考虑相比损坏昂贵的物镜的潜在晶状体组织的相对成本。
当反转(组织培养)显微镜的工作，每一个物镜的前置镜头将会更暴露于粉尘比正置显微镜; 所有的长工作距离干与物镜之间的10倍放大倍率和100X需要定期检查。 倒置显微镜本特殊问题方面的使用油浸物镜因为溢出或迁移油可以很容易地在所述主体和所述伸缩弹簧安装前镜筒之间的接合处侵入到物镜的内部。 如果油被允许累积，可以想见，流动，在重力的作用下，到物镜转台或鼻形件。
当有浸油的终纸巾明显的无残留痕迹，另一种组织应使用从呼吸湿气擦拭镜头。 如前面提到的，一个人必须不通过封闭嘴唇吹到透镜，但是应该呼气轻轻它与口打开，使得没有唾液液滴排出。 此过程应用每次一个新的组织被重复若干次。 继光学清洗，浸油应该使用实验室组织样品载玻片的两面进行清洁。 仪器上的所有区域，如碱或支架的部分，应定期检查浸油的任何痕迹，这如果找到，可与实验室毛巾或软棉布被移除。
用于清洁光学显微镜的实际考虑
当开始清洁，不要忘记使用除了当流体(如浸油)必须去除的除尘风机。
千万不要擦拭干棉签或组织的镜头，因为这会导致划痕！
所推荐的一些制造商不要使用研磨材料，如皮革纸巾，干细麻布，或聚苯乙烯棒。
试图蒸馏水(蒸馏水的膜可以通过呼吸的表面上产生的)，除了当润滑脂是要去除之前不适用任何溶剂。
不要使用乙醇或丙酮为老显微镜的清洁。
不要使用任何的一次性棉签，而不是所描述的棉或聚酯棉签，因为前者不是来自无污染。
不要使用任何的建议偶尔金属棒来代替木(竹)棒，因为前面的镜头可能会更容易损坏。
不要使用任何含加压液体空气光喷雾罐。 从这些喷雾剂加压空气留下轻微的，但很难去除，残留物。
切勿使用酸或氨的清洁物镜的镜头正面。
切勿尝试清洁内部光学表面，相机或适配器光学。
千万不要尝试通过吹显微镜的内部区域去除灰尘，因为灰尘颗粒可能会脱落并下沉到那些人迹罕至的地区。
如何避免污染
双目管的开口应始终无论是与目镜或防尘盖保护。 如果从制造商没有防尘罩可用，铝箔是合适的替代品。 防止灰尘积累基本方法是首先覆盖有两个额外的塑料袋的显微镜，然后由制造商提供的防尘盖。 显微镜不应该被设在那里可以通过酸性或碱性蒸气，例如在或接近湿化学照相实验室受到影响的位置上。
在热带地区，显微镜经常遇到真菌的积累。 虽然有超过10万的真菌物种， 曲霉属的两个成员被认为负责大多数透镜恶化。 对这些真菌生长条件是相当高的温度和高湿度，但它们更适用于低于大多数其它真菌湿度水平。 真菌污染可以通过减少房间或者由空调或通过安装在显微镜上面的红外灯(在为150厘米或5英尺的小距离)的湿度小。 真菌在玻璃表面上生长不受根部附着，并且可以擦去，但不幸的是，残留的腐蚀痕迹留和原始透镜性能不能恢复和透镜必须更换。 有效手段，以避免光学部件的真菌的损坏是以防止其在*的增长 。
结论
提供了理想显微镜室将专门为此目的设计，并结合每可供粉尘，化学蒸气，和其他空气污染物限制污染，以及来自声学和机械振动和温度变化分离仪器机制。 这种理想的情况是很少实现，大多数显微镜都位于受有相当数量的环境缺陷区域。 一些污染是不可避免的，由于日常使用的严酷，但至少是，在显微镜应在由覆盖整个仪器与合适的盖的不使用期间受到保护，以及可能的。 仪器制造商和售后市场供应商提供了各种专门设计的防尘罩的。 现有的几种类型的塑料盖的，那些更柔软更有弹性材料的可能不容易的吸附灰尘。 无绒毛的布套也可用，并提供有效的阻尘，可以大限度地减少需要清洗。
虽然现代研究级显微镜的成本可以从约几几万至几十万美元，如果适当地使用和维护，仪表的基本光学和机械部件可以很容易地经受住显微镜几代。 只有当仪器正确使用和维护是定期它能够产生的图像数据成为可能。 粗心，不正确的操作和维护技术不仅会造成不可靠的劣质图像，但造成的生产力受苦，将大大降低仪器的使用寿命。
