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技术文章
如何测定生物结皮的光合（呼吸）作用和叶绿素荧光参数方法探讨？
点击次数：2095 发布时间：2014-11-14
如何测定生物结皮的光合（呼吸）作用和叶绿素荧光参数方法探讨？
近年来，生物结皮（藻类，苔藓）在沙漠治理研究中越来越得到关注。但在实际工作中，对于生物结皮的光合（呼吸）作用和其叶绿素荧光的具体测定方法，仪器性能的选择，特别是如何在野外无损观测，数据分析等问题有许多值得探究的地方。应中科院老师的要求，我公司尝试摸索了利用我公司生产的便携式光合仪（Yaxin-1102便携式光合蒸腾测定仪）和叶绿素荧光仪（Yaxin-1161G叶绿素荧光仪），对室内人工沙培的蓝藻进行了相关生理指标测量方法的摸索，现小结如下：
一测试样品
图1沙子上人工培养的蓝藻结皮
二测试仪器
图2 Yaxin-1161G叶绿素荧光仪 图3 Yaxin-1102便携式光合仪
三 测试方法
1 光合（呼吸）作用的测定
利用图3 的仪器与特制的光合室相结合，可以测定生物结皮混合体的CO2浓度变化，温度，光照强度等数据，并计算得到结皮的光合速率，呼吸速率等生理指标，用以研究其生理活动的变化和特性。
方法的关键是合适的光合（呼吸）室，测定时间的掌握，相应的仪器功能。Yaxin-1102的功能和结构可以满足室内测试要求。仪器标配意义上的叶室和测量方式都不适合结皮的测量。
2 荧光参数的测定
利用图2的仪器，将仪器的探头紧贴在蓝藻结皮上可以方便的得到荧光测试结果。结果见下图。
图5 蓝藻叶绿素的荧光动力学曲线（OJIP曲线）
| 文件名 | 时间日期 | 项目 | AL（T） | F0 | Fj | Fi | Fm | Fv/Fm |
| sunen0030016 | 20120906 16:54 | OJIP | 3500（1） | 141 | 200 | 213 | 245 | 0.42 |
表一图5 曲线所对应的荧光参数
方法的关键是要在探头的结构上满足每一次测定是光路途径的一致性，并且结构设计上要方便野外原位观察（通常意义上的叶夹是无法原位测量的）。另外，在结皮启动生长的初期，对叶绿素荧光值（Fo，Fm）的分析要结合藻类的具体生理过程分析其含义，不可机械地照搬其他材料的经验数据。
我们还在室内对于野外采集回来的结皮做了光合和荧光的测定，由于样品的生物多样性（同时含有多种藻类，苔藓，其他微生物），在测量光合（呼吸）指标时就难以确定CO2变化的原因，或是主要原因。这是实验者需要特别注意的。叶绿素荧光测量中也存在类似的问题。
以上内容只是整个工作的概述，具体方法细节要根据各实验室的具体要求详细讨论。
北京雅欣理仪科技有限公司
2012-9-17