蛋白电泳技术手册

      在蛋白电泳过程中，配胶麻烦、电泳耗时长、需要反复调试凝胶浓度是我们面临的三个棘手问题。李记生物*研发的EZ Protein系列蛋白电泳产品的克服了上述问题。2-5分钟配胶，浓缩胶、分离胶一次成型；25分钟恒压完成电泳；10-250KD蛋白质一块胶即可分离，免去了反复调整胶浓度的麻烦。*配方，本产品不添加TEMED，没有刺激性气味，丙烯酰胺用量低，是一款绿色安全的新产品。

包装规格

使用方法

1. 取2支小烧杯（小试管亦可），在*个小烧杯中加入试剂盒中的EZ Protein anyKD PAGE 浓缩胶A液1.0ml + EZ Protein anyKD PAGE 浓缩胶B液1.0ml；在另一个烧杯中加入EZ Protein anyKD PAGE 分离胶A液2.5ml + EZ Protein anyKD PAGE 分离胶B液2.5ml；

2. 在5ml 的分离胶溶液中加入10%APS 50ul，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡；

3. 在凝胶模具中灌入适量混匀的分离胶（对于 mini-gel，凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm或距梳齿约0.5cm即可）；

4. 在2ml 的浓缩胶液中加入10%APS 20ul，轻轻搅拌使其混匀后直接灌入凝胶模具中分离胶的上层（不需要等待分离胶凝固）；

5. 将梳子插入凝胶内，静置10~15分钟，等待浓缩胶聚合；

6. 待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，以免破坏加样孔；

7. 调整电泳仪为恒压 300v，进行电泳操作，约30min完成蛋白电泳实验。（300v为绝大多数电泳仪设计可承受电压，正常使用不会损坏仪器。如有担心可以适当降低电压至250v，对电泳速度不会有明显影响。）

注意事项

1. 本试剂盒能够一次性完成浓缩胶和分离胶的制备不会发生浓缩胶和分离胶相互混合的情况；

2. 由于本产品具有快速凝胶的特点，在凝胶配制过程中遵循操作说明使用，不要将分离胶灌入凝胶模具后，才开始配制浓缩胶（间隔时间过长可能会导致分离胶部分聚合），这样灌制浓缩胶时容易引起分离胶与浓缩胶分界面不平，影响电泳效果；

3. 在灌胶过程中使用小烧杯或者小试管作为配胶容器，按照操作说明配制好分离胶和浓缩胶后立即先后将分离胶和浓缩胶灌入凝胶模具中。不建议使用使用移液器缓慢加入可能会导致分离胶和浓缩胶分界面不平。

4. 需要一次性制备多块蛋凝胶时，为防止快速凝胶可以适当减少过硫酸铵的用量；

5. 本产品有针对性的耐高压凝胶系统，可以在常规电泳缓冲液中实现快速电泳的目的；

6. 如长期大量使用凝胶，可以用本试剂盒一次性配制多块凝胶，作为预制胶，放入加有少量电泳缓冲液的自封袋中，于2-8℃环境下长期保存使用；

7. 操作步骤中的凝胶制备是以Mini-gel的规格制定，如需要制备较大的凝胶可以适当调整试剂的用量；

8. 尽管本产品对各种原料已做了调整和修饰，极大的提高了实验操作的安全性，但是依然含有丙烯酰胺，因此操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。

可制备凝胶数量