液相色谱仪过滤技巧

任何颗粒物进进液相色谱仪后都会在柱子进口端被筛板挡住，zui后的结果是将柱子堵塞，表现出的特征是系统压力增加并使色谱峰变形。因此，要采取各种预防 措施，包括操纵步骤和商品仪器自身的各种过滤设计，努力防止或减少颗粒物进进液相色谱仪中，从而延长仪器和色谱柱的使用寿命，并进步数据的可靠性。

在液相色谱仪中，颗粒物的主要来源有三个途径：活动相、被测样品和仪器系统部件的磨损物。
　　
　　1、被测样品
　　使用针筒式过滤器不可能100%得到通过过滤器的被测样品，总会或多或少的丢失。丢失来自这样几方面：过滤器滤膜的吸附、过滤器滤出的颗粒物上的吸附、针筒式滤膜过滤器与针筒连接处的渗漏等。　　
　　2、活动相
　　
　 　无论是液相色谱仪HPLC级的水还是在实验室使用超纯水净化系统制备的水，zui后一步也是通过0.2μm微孔滤 膜。任何一种缓冲液中加进了固体物，必然活动相过滤将。少量杂质颗粒存在于活动相中必然成为残渣。
　　
　　解决办法：2. 1.活动相制备仅采用HPLC级液体时不需要过滤，反之所有活动相组成在使用前必须过滤。
　　
　　2.2在连接储液瓶和泵的输液管的末端进口采用下沉式过滤器（常见材质有熔融玻璃砂芯滤板和微孔金属的两种）也是很重要的。这个过滤器的规格为≥10μm的微孔物质，所以它不能取代活动相过滤步骤，但是它能除往系统中的尘土并保证储液瓶、输液管使用的可靠性。
　　2.3.推荐在HPLC系统中采用一个0.45 或0.5μm的在线多孔过滤器，接在自动进样器和柱子之间，即使已使用了保护柱。这个在线过滤器将成为挡板代替柱头的滤板，而且如采用一个玻璃砂芯滤板， 既便宜，更换又方便（几分钟就可更换）。若采用在线过滤，液相色谱仪检测每批样品开始前记录下压力值，当压力上升一定值，例如25%或增加 500psi，应该更换玻璃砂芯滤板了，更换以后冲洗几分钟系统将恢复到原来的压力值。

　　3、仪器系统部件的磨损物
　　
　　zui后，在液相色谱仪HPLC系统中颗粒物的另一个主要来源是*密封垫和进样阀旋转轴的磨损。关于*密封垫的磨损更换有两种不同建议。
　　
3.1、在一般实验室中*密封垫通常使用寿命为六个月到一年，因此建议半年或一年更换这些密封垫。　　
3.2、原装密封垫的密封效果，更换以后轻易引起活动相渗漏。所以，只要不漏液就不要轻易更换密封垫。