该检测方法采用大肠杆菌产生β-半乳糖苷酶分解色源底物-ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside) 使培养液呈黄色。大肠埃希氏菌产生β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase）分解MUG（4 - methyl-umbelliferyl-β-glucuronide）使培养液在波长366 nm 紫外光下产生荧光的原理,来定性定量水中总大肠菌群、粪大肠菌群（耐热大肠菌群）及大肠埃希氏菌。

LK-2014型酶底物法封口机参数：

序号	指标名称	技术指标
1	名称	程控定量封口机
2	用途	用于GB5750-2006酶底物法检测水质总大肠菌群、大肠埃希氏菌，粪大肠菌群
3	可靠性	无漏液,无破孔
4	稳定性	可检测40,000个样品以上，使用寿命大于5年
5	方便性	开/关及退格键有定量数显窗口,有保洁窗口
6	快捷性	无需无菌室,24h检测水中总大肠菌群\大肠埃希氏菌\耐热大肠菌群
7	重量	≤16kg
8	尺寸	39cm 长 X 27cm 宽 X 30cm 高
9	预热时间	≤14min
10	噪音	<50dba
11	外罩温度	<40ºC
12	封口速度
13	工作电压	AC 220V±10％,50HZ
14	封口速度	51孔、97孔定量检测盘封口时间≤12秒/个
15	工作环境温度	-10ºC-50ºC
16	检测范围	配合51孔定量检测盘检测范围0-200MPN/100ml (水样不稀释）配合97孔定量检测盘检测范围0-2419MPN/100ml (水样不稀释）

酶底物法检测是目前水中大肠杆菌检测的方法，已被上发达国家普遍采用，相比目前国内标准中采用的多管发酵及滤膜法，该方法简便快捷，定量准确，假阳性低。

大肠杆菌存在潜在的危害，国家和行业标准对其做了相应的要求，具体见表1

表1目前国内标准中对水中大肠菌群的要求

标准	指标菌
GB5750-2006，生活饮用水标准	菌落总数，总大肠菌群,粪大肠菌群，大肠埃希氏菌
CJ/T206—2005，城市供水水质标准	细菌总数,总大肠菌群、粪大肠菌群
GB3838-2002，地表水环境质量标准	粪大肠菌群
GB/T 14848-93，地下水质量标准 GB 9667-1996，游泳场所卫生标准	细菌总数、总大肠菌群
GB5084-2005，农田灌溉水质标准	粪大肠菌群

表2多管发酵法、滤膜法及酶底物法比较统计

项目方法	多管发酵法	滤膜法	酶底物法
检测时间	3-5天	2-3天	1天
假阳性	—	23-26%	1%
检测范围	2-1600MPN/100mL	—	1-2419.6MPN/100mL
环境要求	洁净实验室	洁净实验室	无特殊要求
实验人员要求	有专业基础、操作熟练	有专业基础、操作熟练	简单培训即可
定量标准	MPN表	直接计数	MPN表
定量方法	15管	菌落计数	51或97孔板